Улучшите свои данные с помощью надлежащей практики пипетирования

Жидкости с высоким давлением пара могут вызвать быстрые сдвиги концентрации при слишком длительном воздействии воздуха. Предварительно намочите наконечник, работайте быстро и по возможности закрывайте контейнеры. Техника последовательной аспирации, включая опцию обратного пипетирования, может помочь стабилизировать объемы.

Поскольку у пипеток прямого вытеснения отсутствует воздушный зазор, они более точны при работе с жидкостями с высоким давлением пара. Таким образом, они рекомендуются, если точность жизненно важна для применения. 

Выбор подходящей пипетки включает в себя оценку ваших требований. Во-первых, какие образцы вы пипетируете? Являются ли они водными? Или они вязкие, летучие, пенящиеся, коррозионные или опасные? Для водных и околоводных жидкостей хорошим выбором являются наиболее распространенные дозаторы с вытеснением воздуха (также называемые пипетками на воздушной подушке). Для вязких, летучих и других необычных типов жидкостей пипетка прямого вытеснения будет лучшим выбором как для точности, так и для безопасности. 

В каком объеме вы будете пипетировать? Сколько проб нужно перенести с одного судна на другое? Ознакомьтесь с этим техническим документом по выбору пипетки , чтобы понять, какая пипетка лучше всего подходит в зависимости от жидкости и других факторов, уникальных для вашей ситуации.

Микрофлюидные анализы требуют бескомпромиссной точности. Стабилизируйте руку для дозирования, используйте высококачественные наконечники, предназначенные для сверхмалых объемов, и рассмотрите возможность обратного пипетирования для улучшения консистенции. Регулярная калибровка, наряду с контролем факторов окружающей среды, таких как температура, поддерживает точность на этих шкалах. 

Пипетки Rainin в сочетании с тщательно спроектированными микрообъемными наконечниками обеспечивают точный и надежный контроль, необходимый для достижения превосходных результатов в передовых микрофлюидных экспериментах.

При пипетировании густых растворов с помощью многоканальной пипетки пузырьки воздуха вносят погрешности объема и усложняют измерения. Чтобы снизить риск образования пузырьков, предварительно намочите наконечники, медленно отсасывая и дозируя 2-3 раза. Затем медленно отсасывайте, следя за тем, чтобы кончики были полностью погружены в воду на протяжении всего втягивания, чтобы уменьшить количество воздушных карманов. Обратное пипетирование может обеспечить дополнительный контроль в образцах, подверженных образованию пузырьков. 

Поскольку в пипетках прямого вытеснения отсутствует воздушный зазор, пузырьки с меньшей вероятностью повлияют на их точность. При пипетировании большого количества аликвот жидкостей, образующих пузырьки, электронный пипетка-репитер, такая как Nanorep , поможет избежать проблем. Ручные дозаторы положительного вытеснения также полезны в экспериментах с низкой производительностью, где важна точность.

При всасывании держите пипетку как можно ближе к вертикали, избегая угла более 20° от оси Y. При дозировании, если вы касаетесь стенки целевого сосуда, чтобы полностью вытянуть всю жидкость из наконечника, можно превысить угол в 20°.

Прямое пипетирование является стандартным методом пипетирования и лучшим выбором для водных образцов. Для вязких и летучих проб обратное пипетирование обеспечивает более высокую точность.

Чтобы направить пипетку вперед, нажмите на поршень до первого упора, удерживая пипетку вне жидкости. Затем погрузите наконечник на 2-10 мм вглубь жидкости, с которой вы работаете, но не глубже. Медленно отпустите поршень до полного выпрямления, чтобы всосать весь объем жидкости. Чтобы дозировать дозу в целевой сосуд, переместите пипетку в сосуд, затем нажмите на поршень с равномерной скоростью через первый упор до второго упора — по мере продвижения поршня. Полностью надавив на поршень, слегка потяните кончик пипетки вверх по стенке сосуда, чтобы «коснуться». Это помогает полностью дозировать весь объем жидкости. Отпустите поршень, извлеките наконечник пипетки, загрузите новый наконечник пипетки и повторите процедуру.

Чтобы сделать пипетку реверсивной, протолкните поршень до упора до конца через первый упор до второго упора — по мере продвижения поршня. Затем погрузите наконечник в жидкость и медленно и равномерно отпустите поршень для аспирации. Перейдите к приемному сосуду и нажмите на поршень ТОЛЬКО ДО ПЕРВОЙ ОСТАНОВКИ, чтобы выдать нужный объем. В наконечнике пипетки останется небольшой остаточный объем. Переместите пипетку над сосудом для выброса-дозирования и нажмите на поршень до конца до второго упора, также называемого «продувочным» упором, чтобы выпустить оставшуюся жидкость. 

Отпустите поршень, извлеките наконечник пипетки, загрузите новый наконечник пипетки и повторите процедуру.

Ищете больше советов по технике пипетирования? Получите этот полезный плакат для своей лаборатории уже сегодня! 

Дозатор воздушного вытеснения может использоваться для пипетки слабовязких жидкостей, в том числе крови. Для достижения максимальной точности используйте описанную выше технику обратного пипетирования. Для более вязких жидкостей, таких как 85% глицерина или Triton X-100, пипетка прямого вытеснения обеспечивает наилучшую точность и стабильность.

Слаболетучие жидкости, такие как этанол, можно пипетировать с помощью дозатора воздушного вытеснения с использованием вышеупомянутого метода обратного пипетирования. Тем не менее, дозаторы прямого вытеснения являются лучшим выбором для летучих жидкостей. 

Если вы используете дозатор воздушного вытеснения, предварительно промойте наконечник пипетки (аспирируйте и диспенсируйте) не менее пяти раз перед дозированием. Это уравновешивает воздух внутри пипетки, замедляя скорость испарения жидкости. Быстрое испарение летучих жидкостей расширяет воздух внутри пипетки и вытесняет жидкость из наконечника без какого-либо давления на поршень, что снижает точность подачи объема.

Летучие жидкости, такие как ацетонитрил, как правило, лучше обрабатываются с помощью дозатора прямого вытеснения.

Да, при пипетировании с помощью дозаторов воздушного вытеснения могут образовываться аэрозоли. Аэрозоли могут подниматься внутрь пипетки и загрязнять внутренние стенки и поршень. Аэрозолизация происходит более легко, когда поршень выпускается слишком быстро во время аспирации, а также может происходить в обратном направлении за пределы пипетки при слишком быстром дозировании. 

Чтобы свести к минимуму аэрозоли, аспирируйте и дозируйте медленно и равномерно. Используйте отфильтрованные советы. 

В пипетках прямого вытеснения используются наконечники в виде шприца, которые предотвращают распыление. Дозатор прямого вытеснения является лучшим выбором для пипетирования опасных жидкостей и любых жидкостей с повышенной вязкостью или летучестью.

Очень холодные или горячие жидкости изменяют давление воздуха в дозаторах с вытеснением воздуха, что приводит к неточному пипетированию. 

Дозаторы прямого вытеснения со шприцевыми наконечниками, не имеющими воздушного кармана между жидкостью и поршнем, не подвержены воздействию различных температур жидкостей. Пипетки прямого вытеснения обеспечивают точные результаты при работе с жидкостями некомнатной температуры.

Если вам необходимо пипетировать очень горячую или холодную жидкость с помощью дозатора вытеснения воздуха, не промывайте наконечник пипетки предварительно — обычно это лучшая практика для достижения максимальной точности. Вместо этого выполните быструю аспирацию и дозирование, чтобы свести к минимуму влияние температуры жидкости на внутренний воздушный зазор пипетки.

Во избежание образования пузырей и пенообразования при пипетировании не погружайте наконечник более чем на 10 мм в резервуар с жидкостью, а затем медленно отсасывайте.

Обратное пипетирование обеспечивает дополнительную защиту, поскольку перед всасыванием вы полностью нажимаете на поршень до 2-го упора, поэтому вероятность впрыска воздуха в жидкую пробу отсутствует. Для получения дополнительной информации об обратном пипетировании посетите эту страницу. 

Пипетка прямого вытеснения не образует пузырьков или пены при взаимодействии с жидкостью, поскольку ее наконечник в виде шприца не содержит воздуха, с которым жидкость могла бы взаимодействовать.

Обеззаражьте пипетку, протерев ее влажной тканью и моющим средством, таким как изопропанол или 10% раствор отбеливателя. Избегайте прозрачного пластикового окошка микрометра.

Автоклавирование может быть еще одним вариантом, но проверьте технические характеристики прибора вашей пипетки. Если он автоклавируется, то автоклавируется ли весь инструмент или только жидкая часть?  Часто автоклавируется только жидкая часть.

Чтобы узнать больше об очистке пипетки, ознакомьтесь с плакатом « Чистка пипетки ».

С химическими веществами следует обращаться осторожно. Используйте свежие инертные наконечники и регулярно опрыскивайте пипетку этанолом для удаления брызг и остатков. Не допускайте контакта наконечника с поверхностями и часто меняйте наконечники пипетки, чтобы предотвратить перекрестный контакт.

Пипетки Rainin, получившие широкое признание за надежное зацепление наконечника и плавное управление плунжером, обеспечивают безопасную передачу без загрязнения даже при работе со сложными реактивными реагентами.

Точность пипетки, или верность, как ее сейчас называют, — это разница между средним объемом всех измерений (4–10 измерений) и заданным объемом. Когда речь идет о точности пипетки, это объясняется стандартным отклонением всех выполняемых измерений. 

Погрешность пипетки — это количественный термин, обозначающий ее общую точность. Это комбинация истинности (мера систематической ошибки) и точности (мера случайной ошибки). 

Уравнение для неопределенности выглядит следующим образом: 

Неопределенность = Систематическая ошибка + Случайная ошибка * k. k (коэффициент покрытия или Z-оценка) зависит от количества измерений. k=3,31 для четырех измерений и 2 для десяти измерений.

Для получения дополнительной информации о погрешности пипеток и обеспечении точности загрузите этот технический документ.