Micropipetas

Utilizamos micropipetas para transferir con precisión pequeños volúmenes de líquido de un recipiente a otro. Por ejemplo, usamos una micropipeta para transferir el líquido de un matraz de cultivo celular a pocillos individuales en una placa de micropocillos. Las micropipetas se utilizan en ciencia medioambiental y química, desarrollo farmacéutico, ciencia forense, laboratorios de biología y muchas otras áreas.

Muchas micropipetas tienen especificaciones de exactitud muy buenas. Estos instrumentos tienen el potencial de suministrar volúmenes con un error sistemático y aleatorio muy bajos. Sin embargo, la técnica del usuario de la micropipeta puede afectar en gran medida a la exactitud. Tanto el ajuste correcto del volumen como el prelavado y la profundidad de inmersión de la punta de la pipeta, así como la verticalidad y el ritmo del pipeteo, pueden influir en la reproducibilidad.  

Las micropipetas son instrumentos de precisión que se usan a menudo en el laboratorio, por lo que, además de las buenas especificaciones y la técnica correcta, la micropipeta más exacta es la que se calibra con regularidad. Los intervalos de mantenimiento suelen reflejar la cantidad de uso de una micropipeta.

Para utilizar una micropipeta, primero ajuste y bloquee el volumen. A continuación, baje el extremo líquido de la micropipeta hacia una punta de pipeta limpia y vacía. Asegúrese de que la punta de la pipeta esté bien fijada a la micropipeta para conseguir un sellado hermético. Una vez cargada la punta de la pipeta, en una micropipeta manual, deberá presionar el émbolo hasta el primer tope. En los modelos electrónicos, una vez que se ha establecido el volumen y se ha cargado la punta, está lista para aspirar.  

Mientras sostiene la micropipeta verticalmente, sumerja la punta en el líquido a la profundidad adecuada para el tamaño de la punta. Sumergir una punta a demasiada profundidad aumenta la presión y puede llenarla en exceso; sumergirla con poca profundidad puede resultar en la aspiración de aire.  

En una micropipeta manual, suelte lentamente el émbolo para aspirar el volumen de fluido ajustado. En una versión electrónica, pulse el botón para aspirar.

Con el líquido dentro de la punta, lleve la micropipeta hasta el recipiente de destino. En las micropipetas manuales, presione el émbolo hasta el primer tope para dosificar. En una micropipeta electrónica, solo tiene que pulsar el botón de dosificación.  

Por último, para eliminar cualquier resto de líquido, desplace la micropipeta hasta el recipiente de desecho deseado y, en las micropipetas manuales, presione el émbolo hasta el segundo tope de soplado. En las micropipetas electrónicas, utilice el botón para expulsar cualquier líquido residual.

Para minimizar la posibilidad de que se produzcan errores al trabajar con una micropipeta, inicie con un sistema completo de micropipeta y punta para asegurar un ajuste hermético correcto.  

Mantenga la micropipeta lo más vertical posible mientras trabaja. En las micropipetas manuales, ajuste el volumen colocando el micrómetro ligeramente por encima del volumen deseado. A continuación, bájelo hasta el número deseado. Cada vez que cargue una punta nueva, lávela previamente para optimizar las condiciones dentro de esta y obtener un pipeteo de gran exactitud. Mientras aspira y dosifica, mantenga una velocidad constante, manteniendo el ritmo en cada paso del protocolo.  

La dosificación por debajo de la superficie objetivo-líquido cuando sea posible o el desprendimiento (limpiar la punta por la pared interna del recipiente cuando se completa la dosificación) son dos maneras de maximizar la exactitud del volumen que dosifica.

Se suele hacer referencia a los mismos tipos de instrumentos en ambos sentidos: algunos los llaman pipetas y otros, micropipetas. El uso popular ha unido estos términos para referirse a los mismos instrumentos, aunque las micropipetas pueden definirse de manera más acotada como instrumentos capaces de microinyectar fluido directamente en las células. Las pipetas, un término más amplio, abarcan instrumentos que van desde goteros y tubos operados por boca hasta pipetas serológicas y sistemas de pipeteo de alto rendimiento.

Las micropipetas son pipetas capaces de medir y dosificar soluciones líquidas en un rango de volumen de 1 μl a 1000 μl. Se suelen utilizar en investigaciones relacionadas con las ciencias de la vida en las que se requiere la medición y dosificación exactas de soluciones.