Biologiska läkemedel nedströmsprocesser

Molekylen av intresse kan antingen utsöndras eller kan ackumuleras i cellerna. När detta händer måste cellerna först störas, nedbrytning förhindras och föroreningar separeras från den molekyl de är intresserade av.

Centrifugering och mikrofiltrering är optimala metoder för att separera molekylen från cellen, och endast supernatanten kan samlas in för ytterligare rening.

Realtidsmätning av tryck, flöde, partikelackumulering , storleksfördelning, pH eller turbiditet hos celler både som matas in och ut ur filter kan ge återkopplingskontroll för att minimera processstörningar.

Virus inaktiveras och görs icke-patogena. In-line-spektroskopi , turbiditet, pH-övervakning och kontroll garanterar konsekvens genom hela processen.

Målprodukten isoleras och koncentreras med kromatografi.

Medan antikroppar fångas upp genom affinitetskromatografi med hjälp av hartser med protein A, protein G eller andra selektivt konstruerade metoder, fångas oligonukleotider och icke-proteinmolekyler ofta genom jonbyteskromatografi , polysackarider och komplex glykan genom hydrofob interaktion eller IMAC-kromatografi.

Vanliga mätningar inkluderar tryck, flöde, pH, Fourier transform infraröd (FTIR) spektroskopi, UV-Vis och konduktivitet före kromatografikolonnen för att övervaka variabla matningsingångar och ge information om kolonnens kvalitet och prestanda. 

Med reningssteget avlägsnas de kvarvarande föroreningarna (t.ex. proteiner, nukleinsyror, endotoxiner etc.) genom en följd av enhetsoperationer – klarning, extraktion, kromatografi, tangentiell flödesfiltrering – medan produkten behålls så mycket som möjligt och koncentreras ytterligare med hjälp av tangentiell flödesfiltrering (TFF) via ultra/diafiltrering (UF/DF).

Målet är att öka renheten utan att förlora avkastning. Övervakning av flöde, tryck, konduktivitet, pH, turbiditet och sträckvikt under buffertberedning och rening säkerställer tillförlitlighet under hela processen.

Virus inaktiveras och görs icke-patogena för att säkerställa bioterapeutiska produkters säkerhet genom att ändra lösningens miljö (sänka pH-värdet eller tillsätta lösningsmedel/rengöringsmedel). In-line-spektroskopi, turbiditet, pH- och ORP-övervakning och kontroll garanterar konsekvens under hela processen.

Med polering uppnås den slutliga renheten.

Forskare använder storleksuteslutningskromatografi och tangentiell flödesfiltrering för att avlägsna spårföroreningar - viruspartiklar, bakteriella patogener och endotoxiner - och byta ut reningsbufferten mot formulering ett.

Medan FTIR-spektroskopi kan hjälpa till att kvantifiera och specificera fraktionskomponenter under poleringskromatografi, övervaka tryck, flöde, konduktivitet, pH och turbiditet i alla poleringsenhetens operationer – inklusive buffertberedningen, löfte om produktsäkerhet och kvalitet.