UV Vis-kalibrering

UV/VIS Excellence-spektrofotometrar är testade i enlighet med procedurerna definierade i USA:s farmakopé (USP) 43 – NF 38 och den europeiska farmakopén (Ph. Eur.) Ed. 10. Testerna omfattar följande parametrar:

• Våglängdsnoggrannhet
• Fotometrisk noggrannhet
• Fotometrisk repeterbarhet
• Fotometrisk linjäritet*
• Ströljus
• Upplösning

Parametrar som inte krävs av varken USP eller Ph. Eur. är även testade:

• Våglängdsrepeterbarhet
• Fotometriskt ljud
• Baslinjens planhet
• Fotometrisk drift

De omfattande testerna säkerställer att alla aspekter av spektrofotometrarnas prestanda utvärderas. Våra UV7 Excellence-spektrofotometrar överensstämmer med de strikta kraven som beskrivs mer detaljerat nedan.

*Den fotometriska linjäriteten nämns inte längre uttryckligen i den 43:e upplagan. Den fotometriska noggrannheten måste testas över det avsedda driftsområdet. Därför rekommenderar METTLER TOLEDO fortfarande testet för fotometrisk linjäritet.

Våglängdsnoggrannheten utvärderar instrumentets förmåga att troget återskapa våglängder. Mätningen av våglängdsnoggrannheten tillåter utvärdering av om det föreligger förskjutningar av felinställning av våglängdsaxeln.

Lämpliga referensmaterial för utvärdering av våglängdsnoggrannheten bör uppvisa smala och väldefinierade toppar. Holmiumoxidlösning används ofta för detta ändamål.

USP och Ph. Eur. anger olika acceptanskriterier beroende på referensmaterialet som används och deras våglängdsintervall. För flytande referensmaterial gäller följande kriterier:

USP: ±1 nm under 400 nm; ±2 nm över 400 nm
Ph. Eur.: ±1 nm under 400 nm; ±3 nm över 400 nm

Enligt USP och Ph. Eur. krävs inte våglängdsnoggrannhet eller repeterbarhet för matrisbaserade spektrofotometrar. Tack vare de rörliga delarna utsätts de matrisbaserade instrumenten inte för förskjutningar mellan mätningarna.

Fotometrisk noggrannhet är ett mått på instrumentets förmåga att mäta absorption och att returnera absorptionsvärden så nära det verkliga värdet som möjligt.

Man kan avgöra fotometrisk noggrannhet genom att mäta solida eller flytande filter med kända koncentrations- och absorptionsvärden och jämföra den uppmätta absorptionen med absorptionsreferensvärden.

En lösning med 60 mg/L kaliumdikromat (PDC) används för det utltravioletta intervallet och ett 0,5 A filter med neutral densitet (ND) täcker det synliga intervallet. Acceptanskriteriet är samma för båda farmakopéerna och är beroende av absorptionsnivån i referensmaterialet.

PDC: ±0,010 A under 1,0 A; ±1,0% (0.010*A) över 1,0 A
ND: ±0,008 A under 1,0 A; ±0,8% (0.008*A) över 1,0 A

Enligt USP och Ph. Eur. krävs inte våglängdsnoggrannhet eller repeterbarhet för matrisbaserade spektrofotometrar. Tack vare de rörliga delarna utsätts de matrisbaserade instrumenten inte för förskjutningar mellan mätningarna.

Fotometrisk repeterbarhet, även kallat fotometrisk precision av USP, definierar spektrofotometerns kapacitet att returnera absorptionsvärden över flera mätningar på ett tillförlitligt och repeterbart sätt.

Här används samma referensmaterial som används för att avgöra fotometrisk noggrannhet. Filtrena mäts sex gånger och standardavvikelsen över alla mätningar beräknas för att utvärdera repeterbarheten.

Standardavvikelsen, som inte får överskrida 5 mA under 1 A eller 0,5% över 1 A, oavsett vilket referensmaterial eller vilket våglängdsintervall som används.

Obs!: fotometrisk repeterbarhet krävs inte av Ph. Eur.

Fotometrisk linjäritet är ett mått på de uppmätta värdenas linjäritet (t.ex. absorption) som en funktion för ökad koncentration. Detta är i synnerhet viktigt för kvantitativa applikationer.

Man kan avgöra fotometrisk linjäritet med samma prodecurer och filter som används för att avgöra fotometrisk noggrannhet, dock används olika filter som täcker intervallet mellan 0 A och 2 A vid tre koncentrationer.

USP och Ph. Eur. anger olika acceptanskriterier för fotometrisk linjäritet:

Ph. Eur.: korrelationskoefficienten R2 måste överskrida 0,999.
USP: de uppmätta värdena vid alla koncentrationer/filter måste uppfylla de fotometriska noggrannhetskriterierna.

Ströljus definieras som ljus som når detektorn men som inte är en del av analysen. Det orsakar en förspänning vid motsvarande våglängd men härstammar inte från en insats av det uppmätta provet. Därmed förändrar ströljuset provets absorption och provresultaten inkluderar ett systematiskt fel.

Man kan avgöra ströljus genom mäta ett avklippt filter (en vattenhaltig kaliumkloridlösning) med hjälp av både den specifika våglängdsmetoden (SWM) och metoden för lösningsfilterförhållande (SFRM).

Acceptanskriterier angivna av USP och Ph. Eur. för KCl är följande:

SWM: Amax ≥ 2,0 A
SFRM: Amax ≥ 0,7 A

Upplösning definierar upplösningsförmågan i en UV Vis-spektrofotometer och dess förmåga att lösa upp angränsande strukturer i ett spektrum.

Man kan avgöra upplösning genom att mäta en lösning av toluen i n-hexane. Min. och max. absorption för en skarp och väl upplöst topp används för bedömningen av upplösningen.

USP anger att förhållandet mellan min. och max. absorption, vid respektive våglängder på 267 och 269 nm, måste överskrida 1,3 för att tillhandahålla tillräcklig upplösning. Ph. Eur. anger acceptanskriterierna i den enskilda monografen.

Till skillnad från UV Vis-skaningsspektrofotometrar, har matrisbaserade instrument inte en fysisk slits som mekaniskt definierar instrumentets spektrala bandbredd (SBW). Motsvarande SBW för ett matrisinstrument kan beräknas från instrumentets upplösning.
T.ex. är UV7 Excellence-spektrofotometerns upplösning ≥ 1,9, vilket motsvarar SBW ≤ 1,0 nm.

De definierade testerna ovan kan utföras antingen manuellt eller automatiskt. Manuella metoder har dock en inneboende risk för minskad noggrannhet. Manuella arbetsflöden är tidskrävande och riskerar att vara felbenägna. Automatiserad prestandaverifiering erbjuder följande fördelar:

• Snabbare resultat med spårbar dokumentation och resultatvalidering.
• Det går att undvika fel vid arbetsflödesutförande och datatranskription, testerna behöver inte upprepas.
• Överensstämmelse med dataintegritetsstandarder. Dett är en betydande fördel när det gäller FDA-kompatibel datahantering.
• Snabb avkastning på investeringar tack vare ökad produktivitet och säkerhet.

Regelefterlevnad är ett nyckelmål för alla läkemedelstillverkare och deras leverantörer. Enligt GMP måste tillverkningsprocesserna och de analytiska metoderna valideras, samtidigt som utrustningen som används för produktion och kvalitetskontroll kräver kvalificering.

För att stödja kunderna i att uppfylla denna efterlevnad, erbjuder METTLER TOLEDO EQPac för Excellence UV/VIS-spektrofotometrar. EQPac är en servicelösning som är speciellt utformad för att hantera efterlevnadskrav i dagens krävande, reglerade miljö. Den erbjuder fullständigt dokumenterad, professionell installation och kvalificeringstjänst på plats för att säkerställa regelefterlevnad och tillförlitlig drift.

Ta reda på mer om vår utrustningskvalificeringstjänst och vår kalibreringstjänst för UV/VIS-spektrofotometrar.