Калибровка УФ-ВИД спектрофотометра

Испытание УФ-ВИД спектрофотометров Excellence проводится согласно процедурам, описанным в Фармакопее США (USP 43, NF 38) и Европейской Фармакопее (Ph. Eur. 10). Проверке подлежат следующие параметры:

• точность длины волны.
• фотометрическая точность,
• фотометрическая воспроизводимость,
• фотометрическая линейность*,
• уровень рассеянного света,
• разрешение.

Дополнительно оцениваются параметры, не требуемые Фармакопеей США или Европейской Фармакопеей:

• воспроизводимость длины волны,
• уровень фотометрических шумов,
• дрейф базовой линии,
• фотометрический дрейф.

Комплексная проверка спектрофотометра позволяет осуществить полную оценку всех рабочих характеристик.Спектрофотометры МЕТТЛЕР ТОЛЕДО UV7 Excellence удовлетворяют строгим требованиям, перечисленным ниже.

*Фотометрическая линейность больше не упоминается явно в 43-м издании. Фотометрическая точность должна быть проверена в предполагаемом рабочем диапазоне. Поэтому МЕТТЛЕР ТОЛЕДО по-прежнему рекомендует тест на фотометрическую линейность.

Точность длины волны позволяет оценить возможность прибора точно установить длину волны. Измерение точности установки длины волны позволяет выявить смещение по оси длины волны.

Эталонные материалы, используемые для определения точности длины волны, должны иметь узкие, четко видимые пики. Для этого часто применяется раствор оксида гольмия.

Фармакопея США и Европейская Фармакопея устанавливают разные критерии приемлемости для разных эталонных материалов и диапазонов длины волны. Для жидких эталонных материалов установлены следующие критерии:

Фармакопея США: ±1 нм до 400 нм; ±2 нм от 400 нм.
Европейская Фармакопея: ±1 нм до 400 нм; ±3 нм от 400 нм.

Согласно Фармакопее США и Европейской Фармакопее, точность установки длины волны и ее воспроизводимость не обязательно измерять для диодно-матричных спектрофотометров. Благодаря отсутствию движущихся частей диодно-матричные приборы не подвержены смещению оси между измерениями.

Фотометрическая точность характеризует способность прибора правильно определять коэффициент поглощения.

Фотометрическую точность можно определить сравнением результатов анализов твердых или жидких светофильтров с известным значением поглощения и эталонными данными.

В УФ-диапазоне используется раствор бихромата калия с концентрацией 60 мг/л, а в видимом диапазоне — нейтральный светофильтр 0,5 A. Допустимые пределы отклонений в обеих Фармакопеях одинаковы и зависят от коэффициента поглощения эталонного материала.

Бихромат калия: ±0,010 A до 1,0 A; ±1,0 % (0.010*A) от 1,0 A.
Нейтральный светофильтр: ±0,008 A до 1,0 A; ±0,8 % (0.008*A) от 1,0 A.

Согласно Фармакопее США и Европейской Фармакопее, точность установки длины волны и ее воспроизводимость не обязательно измерять для диодно-матричных спектрофотометров. Благодаря отсутствию движущихся частей диодно-матричные приборы не подвержены смещению оси между измерениями.

Фотометрическая воспроизводимость определяет способность спектрофотометра предоставлять согласованные результаты при многократных измерениях показателя поглощения для одного и того же или аналогичных образцов.

Для определения этого параметра используются те же эталонные материалы, что и для определения фотометрической точности. Поглощение светофильтра измеряется шесть раз, затем для оценки воспроизводимости вычисляется стандартное отклонение по всем результатам.

Допустима величина стандартного отклонения не более 0,005 A до 1 A или 0,5 % от 1 A при любом эталонном материале и длине волны.

Примечание. Измерение воспроизводимости не входит в требования Европейской Фармакопеи.

Фотометрическая линейность отражает линейность зависимости измеренных значений (например, показателя поглощения) от концентрации. Этот параметр особенно важен для анализа концентрации вещества.

Линейность фотометрических результатов определяется с использованием тех же процедур и типов эталонных материалов, что и точность фотометрических результатов, но при трех различных концентрациях и соответствующих показателях поглощения в диапазоне от 0 A до 2 A.

В Фармакопее США и Европейской Фармакопее указаны разные критерии приемлемости для линейности фотометрических результатов:

Европейская Фармакопея: коэффициент корреляции R2 должен быть больше 0,999.
Фармакопея США: измеренные значения при всех концентрациях или показателях поглощения фильтров должны удовлетворять критериям фотометрической точности.

Рассеянный свет — это поток света, который регистрируется детектором, но не входит в анализируемый диапазон длин волн. Наличие этого постороннего потока вносит погрешность в измерения на тех длинах волн, где происходит поглощение света в образце. Таким образом в результатах анализа появляется системная ошибка.

Уровень рассеянного света определяется с помощью отсекающего фильтра (водный раствор хлорида калия) с использованием обоих методов: характерной длины волны (SWM) и раствора-фильтра (SFRM).

Критерии приемлемости согласно Фармакопее США и Европейской Фармакопее для раствора KCl следующие:

Метод SWM: Amax ≥ 2,0 A.
Метод SFRM: Amax ≥ 0,7 A.

Значение разрешения определяет разрешающую способность УФ-ВИД спектрофотометра и его способность измерять параметры близко расположенных структур спектра.

Разрешение определяется с помощью измерений раствора толуола в н-гексане. Для оценки разрешения используются минимум и максимум четкого пика показателя поглощения.

Согласно Фармакопее США, разрешающая способность прибора считается достаточной, если соотношение значений поглощения при 267 нм (минимум) и 269 нм (максимум) превышает 1,3. В Европейской Фармакопее критерий приемлемости установлен в отдельной статье.

В отличие от сканирующих УФ-ВИД спектрофотометров, диодно-матричные приборы не имеют спектральной ширины щели (SBW) прибора. Эквивалентную спектральную ширину щели можно вычислить с использованием разрешения прибора.
Например, разрешение спектрофотометра UV7 Excellence составляет ≥ 1,9, что соответствует спектральной ширине щели ≤ 1,0 нм.

Описанные выше испытания можно проводить вручную или автоматически, однако методы испытания вручную сопряжены с риском возникновения неточности. Процедуры, выполняемые вручную, требуют времени, при этом возможно возникновение ошибок. Автоматическое подтверждение рабочих характеристик имеет следующие преимущества:

• более быстрое получение результатов, включая документирование и валидацию;
• отсутствие ошибок рабочего процесса и регистрации данных — нет необходимости повторять процедуру;
• соответствие стандартам целостности данных — значительно упрощается управление данными в соответствии с требованиями FDA;
• более быстрая окупаемость вложений благодаря повышенной безопасности и производительности.

Соответствие нормативным требованием — важнейшая цель производителей и поставщиков в фармацевтической отрасли. Согласно требованиям GMP, производственный процесс и аналитические методы должны пройти валидацию, а оборудованию для производства и контроля качества необходима квалификация.

Чтобы помочь клиентам выполнить эти требования, МЕТТЛЕР ТОЛЕДО предлагает пакет EQPac для спектрофотометров UV/VIS Excellence. Современные нормативные требования усложняются, и выполнить их поможет EQPac — специальное сервисное решение. Оно включает выполняемые по месту эксплуатации и полностью документируемые услуги по профессиональной установке и квалификации, которые гарантируют соответствие нормативным требованиям и надежность работы.

Узнайте больше об услугах по квалификации оборудования и услугах по калибровке УФ-ВИД спектрофотометров.