紫外可視分分光光度計の性能は測定品質に直接影響を与え、内部光学系の設定が正しく機能しているかどうかに左右されます。これは、さまざまなパラメータの評価によって確認することができます。薬局方では、UV/VIS分光光度計の性能要件と、その要件を確認するために実行する測定手順が専用の章で定められています。これにより正しく信頼性の高い結果を確実に取得できます。
メトラー・トレドの紫外可視分光光度計 Excellenceシリーズの性能検証テスト方法をご説明します。この方法により常に分光計が適切に動作して最大限の性能が保証され、信頼できる結果が得られるようになります。
紫外可視分光光度計 UV/VIS Excellenceは、米国薬局方（USP）43 – NF 38と欧州薬局方（EP/Ph. Eur.）第10版で定められた測定手順に従ってテストが行われます。このテストは以下のパラメータを網羅しています。
さらに、USP（米国薬局方）とEP（欧州薬局方）で求められていない以下のパラメータのテストも行います。
この包括的なテストにより、分光光度計の性能をあらゆる面から確実に評価することができます。当社の分光光度計UV7 Excellenceは、以下に詳しく説明する厳密な要件を満たしています。
*第 43 版では、測光直線性はもはや明示的に言及されていません。 測光精度は、意図した動作範囲でテストする必要があります。 そのため、メトラー・トレドは測光直線性のテストを引き続き推奨しています。
波長精度は、分光計が波長を忠実に再現できる能力を評価するものです。波長精度の測定によって、波長軸のずれの有無を確認できます。
波長精度を確認するための適切な標準物質は、狭く明確なピークを示す必要があります。この目的では酸化ホルミウム溶液が頻繁に使用されています。
USPとPh. Eur.では、使用する標準物質とその波長に応じて異なる承認基準を設定しています。液体の標準物質では以下の基準が適用されます。
USP: ± 1nm（400nm未満の場合）、± 2nm（400nmを超える場合）
Ph. Eur.: ±1nm（400nm未満）、±3nm（400nm以上）
USP/Ph. Eur.によると、アレイベースの分光光度計の場合は、波長精度や繰り返し性は必要ありません。可動部品がないため、アレイベースの機器は測定間で波長軸のずれが生じることがありません。
測光精度は、分光計が吸光度を正確に測定し、真の値にできる限り近い吸光度値を返せる能力の尺度です。
測光精度は、既知の濃度と吸光度値を持つ固体または液体のフィルタを測定し、測定した吸光度と標準吸光度値と比較することで測定できます。
60mg/Lの重クロム酸カリウム（PDC）溶液を紫外範囲に、0.5Aの減光（ND）フィルタを可視範囲に使用します。承認基準は両方の薬局方で同一であり、標準物質の吸光度レベルに応じて異なります。
PDC: ±0.010A（1.0A未満）、±1.0%（1.0A以上）
ND: ±0.008A（1.0A未満）、±0.8%（1.0A以上）
薬局方 (USP、Ph. Eur.)によると、アレイベースの分光光度計の場合は、波長精度や繰り返し性は必要ありません。可動部品がないため、アレイベースの機器は測定間で波長軸のずれが生じることがありません。
USPで測光精度とも呼ばれる測光繰り返し性は、信頼性の高い同じ吸光度値を複数の測定で繰り返し返すことのできる分光光度計の能力を定義します。
測光精度の測定と同じ標準物質を使用します。フィルタを6回測定し、すべての測定の標準偏差を計算することで繰り返し性を評価します。
使用する標準物質や波長範囲に関係なく、標準偏差は5mA（1A未満）または0.5%（1A以上）を超えてはなりません。
備考：測光繰り返し性はPh. Eur.では求められていません。
測光直線性は、上昇する濃度の関数として測定値（吸光度など）が直線性を示すかどうかの尺度です。これは定量アプリケーションで特に重要です。
測光直線性は、測光精度の測定と同じ手順とフィルタを使用して確認できますが、0～2Aを網羅する3つの濃度/異なるフィルタを使用します。
薬局方 (USP、Ph. Eur.)では、測光直線性について異なる承認基準を定めています。
Ph. Eur.：相関係数R2は0.999を超えてはなりません。
USP：すべての濃度/フィルタでの測定値が測光精度の基準を満たしていなければなりません。
迷光は、分光計に達した分析対象光ではない光として定義されています。迷光は対応する波長に偏りを生じさせるもので、測定サンプル以外の原因によって発生します。したがって、サンプルの吸光度は迷光によって変化し、サンプルの結果には系統的誤差が含まれます。
迷光は、特定波長メソッド（SWM）と溶液フィルタ比メソッド（SFRM）の両方を使用したカットオフフィルタ（塩化カリウム水溶液）の測定により確認します。
薬局方(USP、Ph. Eur.)でKClについて定められた承認基準は以下のとおりです：
SWM: Amax ≥2.0A
SFRM: Amax ≥0.7A
分解能は、紫外可視分光光度計の分解能力と、スペクトル内の隣接する構造を分離する能力を定義します。
分解能は、トルエン含有n-ヘキサン溶液を測定することにより確認します。シャープで十分に分離されたピークの最小吸光度と最大吸光度を使用して分解能を評価します。
USPでは、十分な分解能を提供するために、267nmと269nmの波長における最小/最大吸光度の比が1.3を上回る必要があることを定めています。これに対し、Ph. Eur.の承認基準は個別のモノグラフに記載されています。
走査型UV/VIS分光光度計とは異なり、アレイベースの機器には、機器のスペクトル帯域幅（SBW）を機械的に定義する物理的なスリットがありません。アレイベースの機器でこれに相当するSBWは、機器の分解能から計算できます。
たとえば、分光光度計UV7 Excellenceの分解能は≥1.9であるため、SBW ≤1.0nmに対応します。
前述のテストは手動または自動的に実行できますが、手動のメソッドには正確度が低下するという固有のリスクがあります。手動のワークフローは時間がかかり、エラーが発生しやすくなります。自動性能検証には以下のメリットがあります：
規制遵守は、すべての製薬メーカーとサプライヤーにとって重要な目標です。GMPによると、製造プロセスや分析メソッドを検証する必要があります。それと同時に、製造や品質管理に使用する機器の適格性評価も必要です。
お客様がこのような規制遵守の要件に対応できるように、メトラー・トレドでは紫外可視分光光度計UV/VIS Excellence 向けのEQPacをご用意しています。 EQPacは、現代の厳しい規制環境における規制遵守の問題に特に対応するサービスソリューションです。 すべてが文書化された専門家による設置と適格性評価サービスをお客様の現場で実施し、規制遵守と信頼性の高い操作を保証します。
当社の機器適格性評価サービスと紫外可視分光光度計校正サービスの詳細情報はこちらへ。
