Kweekmedia, ook wel groeimedia genoemd, zijn specifieke mengsels van voedingsstoffen en andere stoffen die de groei van micro-organismen, zoals bacteriën en schimmels (gisten en schimmels), ondersteunen. Kweekmedia worden gebruikt voor kwaliteitscontroletests van niet-steriele grondstoffen en eindproducten, evenals voor microbiële besmettingstests (steriliteit) in toepassingen als hygiënebewaking, validatie van sterilisatieprocessen en bepaling van de effectiviteit van conserveermiddelen en antimicrobiële middelen.
Microbiële tellingstests voor niet-steriele producten worden uitgevoerd volgens de geharmoniseerde testprocedures van de Europese, Amerikaanse en Japanse farmacopees. Deze tests, voorheen bekend als Microbial Limit Tests (MLT), bepalen de bioburden van het monster van het product. Dit wordt bereikt door het aantal kolonievormende eenheden te tellen dat op de kweekmedia is gegroeid voor een bekende steekproefomvang (CFU/g). Acceptatiecriteria zijn gebaseerd op het totale aantal aërobe microbieel (TAMC), het totale aantal gisten en schimmels (TYMC). Bovendien worden specifieke tests uitgevoerd om de aan- of afwezigheid van bepaalde micro-organismen te bevestigen die ongewenst kunnen zijn.
De ingrediënten van de kweekmedia variëren afhankelijk van de test die wordt uitgevoerd en het micro-organisme dat van belang is. Meestal zijn kweekmedia gebaseerd op een voedingsbouillon (vloeistof), vaak gemengd met agar en bereid in petrischaaltjes (ze kunnen halfvast of vast zijn). Voor verrijkte of selectieve media worden verdere specifieke componenten toegevoegd.
De bereiding van kweekmedia moet nauwkeurig worden uitgevoerd om ervoor te zorgen dat de microbiologische groei correct wordt bevorderd. De afzonderlijke ingrediënten van de kweekmedia (poeders, gels en vloeistoffen) moeten zorgvuldig worden afgewogen volgens het recept voor de formulering van de kweekmedia. Voor de hoofdcomponenten wordt doorgaans een precisiebalans gebruikt met een afleesbaarheid van 1 mg tot 10 mg. Voor het wegen van sporenelementen, zoals koper en zink, kan een analytische balans nodig zijn. Als er een kleinere hoeveelheid kweekmedia nodig is, moet ervoor worden gezorgd dat de hoeveelheden ingrediënten correct worden herberekend en kan een balans met een hogere leesbaarheid nodig zijn om aan de nauwkeurigheidseisen te voldoen.
Een nauwkeurige voorbereiding van de kweekmedia is essentieel om ervoor te zorgen dat de microbiologische groei correct wordt ondersteund. Bekijk de video om te zien hoe de XPR bovenwegers van METTLER TOLEDO niet alleen helpen om ervoor te zorgen dat uw groeimedia nauwkeurig zijn geformuleerd, maar ook het proces vereenvoudigen om u tijd en moeite te besparen.
De bereiding van formuleringen van kweekmedia, waaronder vloeibare groeimedia en kweekmedia op basis van voedingsagar, is een gebruikelijke procedure in elk microbiologisch laboratorium. Het formuleringsproces van kweekmedia omvat vele stappen en moet met zorg worden uitgevoerd om kruisbesmetting te voorkomen en uiteindelijk de gezondheid van de consument te beschermen.
Afhankelijk van het type product en het doel ervan, zijn er drie hoofdcategorieën van microbiële kwaliteitscontroletests die het gebruik van groeimedia vereisen:
| Soort product | Test | Doel |
|---|---|---|
| Niet-steriel | Microbiële tellingstests | Telt het totale aantal bacteriën en/of schimmels in een monster |
| Niet-steriel | Tests op specifieke organismen | Identificeert aanstootgevende organismen, zoals Salmonella, in het monster |
| Steriel | Steriliteit testen | Controleert de steriliteit van het monster |
De testprocedures voor microbiële limieten worden uitgevoerd om te bepalen of een niet-steriel product voldoet aan de gegeven specificaties voor microbiële kwaliteit. Dergelijke niet-steriele producten omvatten cosmetische, medische en farmaceutische producten die kunnen worden ingenomen, plaatselijk kunnen worden aangebracht of kunnen worden ingeademd. De werkzaamheid van dergelijke producten kan worden aangetast of zelfs teniet gedaan door de aanwezigheid van bepaalde micro-organismen en bovendien kunnen sommige micro-organismen de gezondheid van de consument nadelig beïnvloeden. De microbiële tellingstests zijn een reeks tests die fabrikanten kunnen gebruiken om ervoor te zorgen dat de bioburden van hun eindproducten binnen veilige grenzen blijft.
Hoewel veel landen hun eigen richtlijnen hebben voor het vaststellen van de veiligheid van niet-steriele producten, is er harmonisatie van de belangrijke normen op de Europese, Amerikaanse en Japanse markten, zoals weergegeven in de onderstaande tabel.
| Europese Farmacopee (EP) | Amerikaanse Farmacopee (USP) | Japanse Farmacopee (JP) |
|---|---|---|
| 2.6.12: Microbieel onderzoek van niet-steriele producten: microbiële tellingstests | <61>: Microbieel onderzoek van niet-steriele producten: microbiële tellingstests | 4.05 I: Microbieel onderzoek van niet-steriele producten: microbiële tellingstests |
| 2.6.13: Microbieel onderzoek van niet-steriele producten: tests op gespecificeerde micro-organismen | <62>: Microbieel onderzoek van niet-steriele producten: tests op gespecificeerde micro-organismen | 4.05 II: Microbieel onderzoek van niet-steriele producten: tests op gespecificeerde micro-organismen |
| 5.1.4: Microbiologische kwaliteit van niet-steriele farmaceutische preparaten en stoffen voor farmaceutisch gebruik | <1111>: Microbiologisch onderzoek van niet-steriele producten: acceptatiecriteria voor farmaceutische preparaten en stoffen voor farmaceutisch gebruik | 12: Microbiologisch onderzoek van niet-steriele producten: acceptatiecriteria voor farmaceutische preparaten en stoffen voor farmaceutisch gebruik |
Steriliteitstesten bevestigen dat producten vrij zijn van de aanwezigheid van levensvatbare micro-organismen en zijn van vitaal belang voor medische hulpmiddelen, farmaceutische producten, weefselmaterialen en alle andere materialen die beweren steriel of vrij van levensvatbare micro-organismen te zijn. Naast het identificeren van mogelijke besmetting worden steriliteitstesten ook gebruikt om de antimicrobiële effectiviteit te bepalen en om sterilisatieprocedures te valideren.
| Europese Farmacopee (EP) | Amerikaanse Farmacopee (USP) | Japanse Farmacopee (JP) |
|---|---|---|
| 2.6.1: Steriliteit | <71>: Steriliteitstesten | 4.06: Steriliteitstest |
Bufferoplossingen zijn van vitaal belang in een breed scala aan toepassingen. De voorbereiding van de buffer is echter tijdrovend en arbeidsintensief en moet met zorg worden gedaan om fouten te voorkomen. Als u ondersteuning nodig heeft bij de voorbereiding van de buffer of advies wilt over welke balans aan uw nauwkeurigheidseisen voldoet, staat ons team van experts voor u klaar. Aarzel niet om contact met ons op te nemen voor hulp of advies.
Kweekmedia en groeimedia bestaan vaak uit meer dan vijf ingrediënten, soms wel 30. Dergelijke complexe formuleringsprocessen vereisen veel zorg en aandacht, en zelfs de snelste laboratoriumtechnicus heeft misschien 1,5 uur nodig om een dergelijk mengsel te bereiden.
Berekeningen van kweekmedia
Het typische recept voor kweekmedia produceert 1 liter oplossing voor kweekmedia. Wanneer een ander volume dan 1 liter nodig is, is het noodzakelijk om alle hoeveelheden ingrediënten dienovereenkomstig opnieuw te berekenen en alle nieuwe waarden te registreren. Elke fout in de berekeningen of in het loggen van de nieuwe waarden kan resulteren in een kweekmedium dat niet naar behoren presteert, wat mogelijk ernstige gevolgen kan hebben.
Wegen en registreren van gewichtsresultaten
Bij het volgen van een recept voor kweekmedia, of de herberekende waarden, moet de laboratoriumtechnicus er zeker van zijn dat de juiste hoeveelheid van elk ingrediënt wordt gebruikt en dat inderdaad alle ingrediënten daadwerkelijk zijn toegevoegd. Dit kan vaak betekenen dat de ingrediënten van een lijst moeten worden afgevinkt terwijl ze worden gewogen. Er moet voor worden gezorgd dat transcriptiefouten worden vermeden bij het registreren van de werkelijke gewichten of bij het overbrengen ervan naar een computer. Het gebruik van twee balansen in het voorbereidingsproces van kweekmedia draagt bij aan de complexiteit, vermindert de efficiëntie en verhoogt het risico op fouten.
Invloed van de weging
Ingrediënten van kweekmedia kunnen worden afgewogen in verschillende containers, variërend van weegboten tot bekers van vijf liter. Alle recipiënten, evenals de weegschaal zelf, kunnen onderhevig zijn aan externe invloeden, zoals beweging van lucht, elektrostatische ladingen of het magnetische veld van een roerder, wat aanleiding kan geven tot problemen zoals het tarreren van de weegschaal, drijvende en onstabiele metingen en langere bezinkingstijden. Dergelijke uitdagingen verlengen de tijd om de kweekmedia te maken, wat de productiviteit beïnvloedt.
De moeilijkheden van het wegen in een veiligheidskast of zuurkast
De effecten van de beweging van lucht in een veiligheidskast of zuurkast kunnen worden verlicht door het gebruik van een tochtscherm om de balans en de container te beschermen. Hoewel een tochtscherm een uitstekende manier is om weegfouten te voorkomen, zijn er enkele praktische nadelen:
Documentatie
Niet alleen moeten de kweekmedia volledig worden geëtiketteerd om verwisselingen te voorkomen, alle gegevens met betrekking tot de kweekmedia moeten worden geregistreerd en veilig worden opgeslagen voor toekomstige referentie en traceerbaarheid. Het handmatig verwerken van grote hoeveelheden gegevens is tijdrovend en brengt een groot risico op fouten met zich mee.
De XPR-precisiebalansen van METTLER TOLEDO bieden een hoge nauwkeurigheid en zijn geschikt voor veel van de uitdagingen van de bereiding van kweekmedia, waardoor processen worden vereenvoudigd en de werklast voor laboratoriumtechnici wordt verminderd. Met een afleesbaarheid van 0,1 mg tot 100 mg en een capaciteit tot 10 kg zijn XPR precisiebalansen perfect voor een breed scala aan toepassingen voor de bereiding van kweekmedia.
Recepten direct op de balans
Tot 50 recepten voor de bereiding van kweekmedia kunnen als weegmethoden op de balans worden opgeslagen, zodat technici snel toegang hebben tot het benodigde recept en aan de slag kunnen. Stapsgewijze instructies worden gegeven op het display van de balans, zodat technici gemakkelijk kunnen bijhouden waar ze zich bevinden in het voorbereidingsproces van de kweekmedia.
Automatische berekening en opslag van resultaten
Aan het begin van het recept voor kweekmedia voert de technicus eenvoudig het vereiste volume in en worden de hoeveelheden van de ingrediënten automatisch opnieuw berekend. De balans vraagt de technicus om elk ingrediënt te wegen, slaat het werkelijke gewichtsresultaat op en vergaart automatisch voordat het volgende ingrediënt wordt toegevoegd. Het is niet nodig om de resultaten handmatig vast te leggen en de resultaten kunnen aan het einde automatisch worden afgedrukt.
Geen tochtscherm nodig
Alle XPR precisiebalansen zijn uitgerust met het SmartPan™ weegplateau. SmartPan biedt buitengewone stabiliteit door de effecten van luchtstromen op de weegcel te minimaliseren, waardoor het mogelijk is om zonder tochtscherm met een afleesbaarheid van 1 mg te wegen. SmartPan maakt het mogelijk om tot twee keer zo snel resultaten te leveren als een standaard weegpan.
Eenvoudige reiniging
Schone apparatuur is essentieel om het risico op kruisbesmetting te verkleinen. Het SmartPan-weegplateau houdt gemorste vloeistoffen op de bodem van de pan, waardoor het veilig kan worden weggegooid. De pan en de bodem zijn eenvoudig te verwijderen voor reiniging in de vaatwasser. Een beschermhoes op de behuizing beschermt niet alleen de balans door te voorkomen dat gemorste vloeistoffen de weegcel binnendringen, maar het gladde oppervlak is ook gemakkelijk schoon te maken en voorkomt ophoping van vuil. Er zijn chemisch resistente afdekkingen beschikbaar voor het display die na gebruik eenvoudig kunnen worden verwijderd en weggegooid om kruisbesmetting te voorkomen.
De XPR-precisiebalansen van METTLER TOLEDO kunnen op onze eigen LabX-laboratoriumsoftware worden aangesloten om een volledige workflowoplossing te creëren die uitgebreide datamanagementmogelijkheden biedt. Een gecentraliseerde database biedt alle aangesloten gebruikers toegang tot dezelfde SOP's voor de voorbereiding van kweekmedia, zodat elke technicus dezelfde procedures volgt. De software zorgt automatisch voor alle procesinformatie en berekeningen. De resultaten worden veilig opgeslagen in de database en kunnen op elk moment worden geraadpleegd voor verdere analyse en het genereren van rapporten. De software elimineert praktisch de noodzaak van handmatige registratie van gegevens , zelfs gedetailleerde etiketten kunnen automatisch worden afgedrukt.
De oplossing kan worden geïntegreerd met bestaande ERP/LIMS-systemen, waardoor bidirectionele overdracht van recepten en resultaten mogelijk is. Instrumenten, taken en gebruikers kunnen allemaal centraal worden beheerd; Laboratoriummanagers kunnen de voortgang van taken live volgen zonder dat ze in het laboratorium aanwezig hoeven te zijn. Voor sterk gereguleerde omgevingen helpt de software bij het voldoen aan de FDA ALCOA+-vereisten voor gegevensintegriteit.
Of u nu snelle en betrouwbare pH-metingen nodig heeft of aan strenge regelgeving moet voldoen, METTLER TOLEDO kan u ondersteunen.
De hoogwaardige SevenExcellence-serie biedt een intuïtieve bediening met OneClick™ op het touchscreen, waardoor opgeslagen methoden direct vanaf een snelkoppeling op het startscherm kunnen worden gestart. Intelligent sensorbeheer zorgt ervoor dat uw pH-elektroden altijd in topconditie zijn voor nauwkeurige resultaten. De Seven Excellence-lijn kan worden aangesloten op LabX om traceerbaarheid en data-integriteit te garanderen.
Voor pH-metingen op vlakke oppervlakken, zoals agarplaten, worden gespecialiseerde oppervlakte-elektroden zoals de InLab Surface Pro-ISM aanbevolen.
Wenst u dat de weeg- en documentatieprocessen voor de formulering van kweekmedia minder ingewikkeld waren? Is het u bekend om een geoptimaliseerde formulering te reproduceren? Lees onze informatiegids en ontdek hoe op maat gemaakte instrumenten, software en accessoires R&D-laboratoria kunnen ondersteunen bij het bereiken van een hoge mate van weegbetrouwbaarheid, consistentie, algehele kosteneffectiviteit en productkwaliteit.
Om het risico op fouten te vermijden, is de beste manier om het opnieuw te berekenen elektronisch. Als de recepthoeveelheden beschikbaar zijn in een spreadsheet, kunnen de nieuwe waarden snel worden berekend. Wanneer u een XPR-precisiebalans gebruikt, kunt u uw formuleringsmethode voor kweekmedia zo instellen dat u wordt gevraagd het vereiste volume in te voeren en dan worden de doelhoeveelheden automatisch berekend. De balans zal u vragen om de vereiste hoeveelheden.
De weegtoleranties moeten worden gedefinieerd in de SOP van uw voorbereiding van kweekmedia. Ze kunnen nauwkeurig worden gespecificeerd of in een percentage worden gegeven. Als u het receptvolume moet wijzigen, is er de extra uitdaging om ook de boven- en ondergrenzen van het gewicht met betrekking tot de toleranties opnieuw te berekenen. Bij XPR-precisiebalansen worden de toleranties als percentage meegenomen bij het maken van het recept voor kweekmedia. De boven- en ondergrens van het gewicht worden automatisch berekend voor elk doelvolume. De ingebouwde weeggids helpt u bij het doseren tot het doel en wordt groen weergegeven als u zich binnen het tolerantiebereik bevindt.
De eenvoudigste manier is om uw kweekmedia-ingrediënten te ordenen volgens de lijst en ze één voor één af te vinken terwijl u ze toevoegt. Dit proces moet echter ijverig worden uitgevoerd om fouten te voorkomen. Door uw kweekmedia SOP als methode op uw XPR-saldo op te slaan, zal de balans u voor elk ingrediënt op naam en met de vereiste hoeveelheid vragen. Nadat u het ingrediënt hebt gewogen, worden het gewichtsresultaat en de naam van het ingrediënt automatisch opgeslagen in het ingebouwde resultatenprotocol dat u op elk moment kunt bekijken. De balans tarreert automatisch en vraagt u om het volgende ingrediënt.
Op onze XPR-balansen worden de gewichten van de ingrediënten van de kweekmedia automatisch opgeslagen in het ingebouwde resultatenprotocol en kunnen ze op elk moment worden bekeken. De uiteindelijke resultaten kunnen worden afgedrukt of naar een pc worden overgebracht.
De beste balans hangt af van uw toepassing en uw nauwkeurigheidsvereisten. Bij het kiezen van een balans moet u rekening houden met:
In metrologische termen zijn deze overwegingen noodzakelijk om het minimumgewicht, de capaciteit van de balans en het veilige weegbereik te definiëren. De gratis GWP® Recommendation service van METTLER TOLEDO helpt u bij het kiezen van de juiste balans voor uw behoeften en bepaalt of uw bestaande balans geschikt is voor het beoogde doel.
XPR-balansen zijn voorzien van kwaliteitsborgingsfuncties, zodat u er zeker van kunt zijn dat de balans waterpas staat en dat routinetests up-to-date zijn voordat u begint met wegen. De status van de balans wordt aangegeven door de StatusLight™ dat in de voorkant van de balansterminal is ingebouwd. In één oogopslag zie je dat groen betekent dat het veilig is om te wegen, geel is een waarschuwing en fouten worden in rood weergegeven.
De ingebouwde routinetestbibliotheek bevat aanpasbare sjablonen voor excentriciteits-, reproduceerbaarheids- en gevoeligheidstests. Om traceerbaarheid te garanderen, wordt een register bijgehouden van alle routinetests.
LabX-laboratoriumsoftware biedt maximale ondersteuning voor compliance. Door uw SOP's in LabX te implementeren, kunt u er zeker van zijn dat alle gebruikers dezelfde procedures voor de bereiding van kweekmedia volgen. De software kan ook alle kwaliteitsborgingsfuncties beheren, inclusief het plannen van routinetests en het blokkeren van de balans indien nodig. Alle resultaten en procesinformatie worden veilig opgeslagen in een centrale database om traceerbaarheid te garanderen en te helpen bij de naleving van FDA CFR part 11.
Wanneer een balans niet kalibreert, is de kans groot dat de weegcel wordt beïnvloed door elektrostatische ladingen of luchtstromingen.
Elektrostatische ladingen kunnen zich bij normaal gebruik ophopen op containers en monsters, zodat u niets verkeerd doet. Soms kan de balans kalibreren, maar is de gewichtswaarde die op de balans wordt weergegeven mogelijk niet de werkelijke hoeveelheid van de toegevoegde stof, wat zou kunnen verklaren waarom de reproduceerbaarheid slecht is. Om elektrostatische ladingen uit uw containers en monsters te verwijderen, kunnen vrijstaande ionisatoren naast uw balans worden geplaatst.
Oplossen van problemen kan ook ontstaan door het gebruik van een veiligheidskast of zuurkast.
In dergelijke omgevingen kunnen turbulente of laminaire stromingsluchtstromingen een kracht uitoefenen op de weegcel, waardoor de balans niet vereffent en de reproduceerbaarheid wordt beïnvloed.
Het SmartPan-weegplateau op XPR-precisiebalansen minimaliseert de effecten van luchtstromen op de weegcel. SmartPan biedt een hogere stabiliteit dan een standaard weegplateau, waardoor de resultaten tot twee keer zo snel kunnen worden geleverd en de reproduceerbaarheid wordt verbeterd.
XPR-balansen bevatten functies om voorbeeldlabels te configureren met alle informatie die u nodig hebt, inclusief automatische berekening van de vervaldatum. Zelfs barcodes kunnen worden toegevoegd. Het etiket kan automatisch worden afgedrukt aan het einde van de voorbereidingsprocedure voor kweekmedia. De etiketten van METTLER TOLEDO zijn bestand tegen de temperaturen van sterilisatieprocessen in autoclaven.
Een goed idee is om barcode-etiketten op uw ingrediënten op te nemen om elk monster uniek te identificeren. XPR-balansen ondersteunen barcodelezers; De barcode van het ingrediënt wordt gescand voordat deze aan het kweekmediamengsel wordt toegevoegd, zodat u gemakkelijk kunt controleren of u het juiste ingrediënt heeft. Door uw XPR-balans aan te sluiten op LabX, wordt er een waarschuwing gegeven als u dezelfde barcode opnieuw scant, zodat het niet mogelijk is om hetzelfde ingrediënt twee keer toe te voegen.
LabX laboratoriumsoftware kan eenvoudig worden geïntegreerd met uw LIMS om bidirectionele overdracht van informatie mogelijk te maken tussen uw LIMS en de instrumenten die op LabX zijn aangesloten, inclusief eventuele balansen die worden gebruikt voor de bereiding van kweekmedia.
