Gojišča, znana tudi kot rastni mediji, so specifične mešanice hranil in drugih snovi, ki podpirajo rast mikroorganizmov, kot so bakterije in glive (kvasovke in plesni). Gojišča se uporabljajo za preskuse kontrole kakovosti nesterilnih surovin in končnih izdelkov ter za preskuse mikrobne kontaminacije (sterilnosti) v aplikacijah, kot so spremljanje higiene, validacija procesa sterilizacije in določanje učinkovitosti konzervansov in protimikrobnih sredstev.
Mikrobni testi za nesterilne izdelke se izvajajo v skladu z usklajenimi testnimi postopki evropske, ameriške in japonske farmakopeje. Ti testi, prej znani kot mikrobni mejni testi (MLT), določajo biološko obremenitev vzorca izdelka. To se doseže s štetjem števila enot, ki tvorijo kolonije, ki so zrasle na gojišču za znano velikost vzorca (CFU/g). Merila sprejemljivosti temeljijo na skupnem številu aerobnih mikrobov (TAMC), skupnem številu kvasovk in plesni (TYMC). Poleg tega se izvajajo posebni testi za potrditev prisotnosti ali odsotnosti nekaterih mikroorganizmov, ki se lahko izkažejo za sporne.
Sestavine gojišča se razlikujejo glede na opravljeni preskus in mikroorganizem, ki ga zanima. Najpogosteje gojišča temeljijo na hranilni juhi (tekočini), pogosto pomešani z agarjem in pripravljeni v petrijevkah (lahko so poltrdni ali trdni). Za obogatene ali selektivne gojišča se dodajo dodatne specifične sestavine.
Priprava gojišča mora biti izvedena natančno, da se zagotovi pravilno spodbujanje mikrobiološke rasti. Posamezne sestavine gojišča (praški, geli in tekočine) je treba skrbno pretehtati v skladu z receptom za formulacijo gojišča. Za glavne sestavne dele se običajno uporablja natančna tehtnica z berljivostjo od 1 mg do 10 mg. Za tehtanje elementov v sledovih, kot sta baker in cink, je lahko potrebna analitska tehtnica. Če je potrebna manjša količina gojišča, je treba poskrbeti za pravilen ponovni izračun količin sestavin in morda bo potrebna tehtnica z večjo berljivostjo, da se izpolnijo zahteve glede točnosti.
Natančna priprava gojišča je bistvenega pomena za zagotovitev pravilne podpore mikrobiološke rasti. Oglejte si videoposnetek in si oglejte, kako natančne tehtnice XPR podjetja METTLER TOLEDO ne le pomagajo zagotoviti natančno formulacijo vaših rastnih medijev, temveč tudi poenostavijo postopek, da vam prihranijo čas in trud.
Priprava formulacij gojišča, vključno s tekočimi rastnimi mediji in gojišči na osnovi hranilnega agarja, je običajen postopek v vsakem mikrobiološkem laboratoriju. Postopek formulacije gojišča vključuje številne korake in ga je treba izvajati previdno, da se prepreči navzkrižna kontaminacija in na koncu zaščiti zdravje potrošnikov.
Glede na vrsto izdelka in njegov namen obstajajo tri glavne kategorije testov mikrobnega nadzora kakovosti, ki zahtevajo uporabo rastnih gostilj:
| Vrsta izdelka | Preskus | Namen |
|---|---|---|
| Nesterilno | Preskusi mikrobnega štetja | Šteje skupno število bakterij in/ali glivic v vzorcu izdelka |
| Nesterilno | Preskusi za posebne organizme | Identificira sporne organizme, kot je salmonela, v vzorcu izdelka |
| Sterilno | Preskusi sterilnosti | Preveri sterilnost vzorca izdelka |
Preskusni postopki mikrobnih omejitev se izvajajo, da se ugotovi, ali je nesterilni izdelek skladen z danimi specifikacijami za mikrobno kakovost. Takšni nesterilni izdelki vključujejo kozmetične, zdravstvene in farmacevtske izdelke, ki se lahko zaužijejo, uporabljajo lokalno ali inhalirajo. Na učinkovitost takšnih izdelkov lahko vpliva ali celo odpravi prisotnost nekaterih mikroorganizmov, poleg tega pa lahko nekateri mikroorganizmi negativno vplivajo na zdravje potrošnika. Mikrobni testi za oštevanje so vrsta testov, ki jih lahko proizvajalci uporabijo, da zagotovijo, da biološka obremenitev njihovih končnih izdelkov ostane v varnih mejah.
Medtem ko imajo številne države svoje smernice za ugotavljanje varnosti nesterilnih izdelkov, obstaja uskladitev pomembnih standardov na evropskem, ameriškem in japonskem trgu, kot je prikazano v spodnji tabeli.
| Evropska farmakopeja (EP) | Farmakopeja ZDA (USP) | Japonska farmakopeja (JP) |
|---|---|---|
| 2.6.12: Mikrobni pregled nesterilnih izdelkov: Preskusi mikrobnega števila | <61>: Mikrobni pregled nesterilnih izdelkov: Preskusi mikrobnega štetja | 4.05 I: Mikrobni pregled nesterilnih izdelkov: Preskusi mikrobnega števila |
| 2.6.13: Mikrobna preiskava nesterilnih izdelkov: preskusi za določene mikroorganizme | <62>: Mikrobno preskušanje nesterilnih izdelkov: Preskusi za določene mikroorganizme | 4.05 II: Mikrobni pregled nesterilnih izdelkov: preskusi za določene mikroorganizme |
| 5.1.4: Mikrobiološka kakovost nesterilnih farmacevtskih pripravkov in snovi za farmacevtsko uporabo | <1111>: Mikrobiološka preiskava nesterilnih izdelkov: merila sprejemljivosti farmacevtskih pripravkov in snovi za farmacevtsko uporabo | 12: Mikrobiološki pregled nesterilnih izdelkov: Merila sprejemljivosti za farmacevtske pripravke in snovi za farmacevtsko uporabo |
Testiranje sterilnosti potrjuje, da izdelki ne vsebujejo živih mikroorganizmov in so bistvenega pomena za medicinske pripomočke, farmacevtske izdelke, tkivne materiale in vse druge materiale, ki trdijo, da so sterilni ali brez živih mikroorganizmov. Poleg prepoznavanja morebitne kontaminacije se testiranje sterilnosti uporablja tudi za določanje protimikrobne učinkovitosti in za potrjevanje postopkov sterilizacije.
| Evropska farmakopeja (EP) | Farmakopeja ZDA (USP) | Japonska farmakopeja (JP) |
|---|---|---|
| 2.6.1: Sterilnost | <71>: Preskusi sterilnosti | 4.06: Preskus sterilnosti |
Puferske raztopine so bistvenega pomena v številnih aplikacijah. Vendar pa je priprava pufra zamudna in delovno intenzivna in jo je treba opraviti previdno, da se izognemo napakam. Če potrebujete pomoč pri pripravi pufra ali želite nasvet, katera tehtnica ustreza vašim zahtevam glede natančnosti, je naša ekipa strokovnjakov tukaj za vas. Ne oklevajte in nas kontaktirajte za pomoč ali nasvet.
Mediji za rast kultur so pogosto sestavljeni iz več kot petih sestavin, včasih tudi 30. Takšni zapleteni postopki formulacije zahtevajo veliko skrbi in pozornosti, in tudi najhitrejši laboratorijski tehnik lahko potrebuje 1,5 ure za pripravo takšne mešanice.
Recepti za rastne medije
Tipičen recept za kulturne medije proizvede 1 liter raztopine za kulturne medije. Kadar je potrebna prostornina, ki ni 1 liter, je treba ustrezno ponovno izračunati vse količine sestavin in zabeležiti vse nove vrednosti. Vsaka napaka pri izračunih ali beleženju novih vrednosti lahko povzroči, da gojišče ne deluje po potrebah, kar lahko povzroči hude posledice.
Tehtanje in beleženje rezultatov teže
Pri upoštevanju recepta za gojišče ali preračunanih vrednosti mora biti laboratorijski tehnik prepričan, da je uporabljena prava količina vsake sestavine in da so bile vse sestavine dejansko dodane. To lahko pogosto pomeni, da sestavine odkljukate s seznama, ko jih tehtajo. Paziti je treba, da se preprečijo napake pri prepisovanju pri beleženju dejanskih uteži ali pri prenosu v računalnik. Uporaba dveh tehtnic v postopku priprave gojišča povečuje kompleksnost, zmanjšuje učinkovitost in povečuje tveganje za napake.
Vplivi tehtanja
Sestavine gojišča se lahko stehtajo v različne posode, od tehtanja čolnov do petlitrskih čaš. Vse posode, kot tudi sama tehtnica, so lahko izpostavljene zunanjim vplivom, npr. gibanju zraka, elektrostatičnim nabojem ali magnetnemu polju mešalnika, kar lahko povzroči težave, kot so tariranje tehtnice, drsenje in nestabilni odčitki ter daljši časi usedanja. Takšni izzivi podaljšujejo čas za ustvarjanje kulturnih medijev, kar vpliva na produktivnost.
Težave pri tehtanju v varnostni omari ali digestorju
Učinke gibanja zraka v varnostni omari ali digestorju je mogoče ublažiti z uporabo zaščite proti prepihu za zaščito tehtnice in posode. Medtem ko je ščit proti prepihu odličen način za preprečevanje napak pri tehtanju obstaja nekaj praktičnih pomanjkljivosti:
Dokumentacija
Ne samo, da morajo biti gojišča v celoti označena, da bi se izognili kakršnim koli zamenjavam, ampak morajo biti vsi podatki, povezani z gojišči, zabeleženi in varno shranjeni za prihodnjo uporabo in sledljivost. Ročna obdelava velikih količin podatkov je zamudna in prinaša veliko tveganje za napake.
Natančne tehtnice XPR podjetja METTLER TOLEDO ponujajo visoko raven natančnosti in naslavljajo številne izzive pri pripravi gojišča, poenostavljajo postopke in zmanjšujejo delovno obremenitev laboratorijskih tehnikov. Z možnostjo odčitavanja od 0,1 mg do 100 mg in zmogljivostjo do 10 kg so natančne tehtnice XPR kot nalašč za široko paleto aplikacij za pripravo gojišč.
Recepti neposredno na tehtnici
Na tehtnico je mogoče shraniti do 50 receptov za pripravo gojišča kot metode tehtanja, kar tehnikom omogoča hiter dostop do potrebnega recepta in začetek dela. Navodila po korakih so na voljo na zaslonu tehtnice, tako da lahko tehniki enostavno spremljajo, kje so v postopku priprave gojišča.
Avtomatski izračuni in shranjevanje rezultatov
Na začetku recepta za gojišča tehnik preprosto vnese zahtevano količino in količine sestavin se samodejno preračunajo. Tehtnica pozove tehnika, da stehta vsako sestavino, shrani dejanski rezultat teže in samodejno zakoljuje pred dodajanjem naslednje sestavine. Rezultatov ni treba beležiti ročne, rezultati pa se lahko na koncu samodejno natisnejo.
Ščit pred prepihom ni potreben
Vse natančne tehtnice XPR so opremljene s tehtno posodo SmartPan™. SmartPan zagotavlja izjemno stabilnost, saj zmanjšuje učinke zračnih tokov na tehtnico, kar omogoča tehtanje z odčitkom 1 mg brez prepihne zaščite. SmartPan omogoča do dvakrat hitrejše rezultate kot pri standardni tehtalni posodi.
Enostavno čiščenje
Čista oprema je bistvenega pomena za zmanjšanje tveganja navzkrižne kontaminacije. Tehtnica SmartPan zadrži morebitno razlitje na dnu posode in tako omogoča varno odstranjevanje. Ponev in podnožje se zlahka odstranita za čiščenje v pomivalnem stroju. Zaščitni pokrov na telesu ne ščiti le tehtnice, saj preprečuje vstop razlitja v tehtnico, temveč je gladka površina enostavna za čiščenje in preprečuje nabiranje umazanije. Za prikazovalnik tehtnice so na voljo kemično odporni pokrovi, ki jih je mogoče po uporabi preprosto dvigniti in zavreči, da se izognete navzkrižni kontaminaciji.
Natančne tehtnice XPR podjetja METTLER TOLEDO lahko povežete z našo lastniško laboratorijsko programsko opremo LabX in ustvarite celovito rešitev za potek dela, ki ponuja celovite zmogljivosti upravljanja podatkov. Centralizirana baza podatkov vsem povezanim uporabnikom omogoča dostop do istih SOP za pripravo kulturnih medijev, kar zagotavlja, da vsak tehnik upošteva enake postopke. Programska oprema samodejno poskrbi za vse informacije o procesu in izračune. Rezultati so varno shranjeni v bazi podatkov in so lahko kadar koli dostopni za nadaljnjo analizo in ustvarjanje poročil. Programska oprema praktično odpravlja potrebo po ročnem beleženju podatkov – tudi podrobne nalepke se lahko natisnejo samodejno.
Rešitev je mogoče integrirati z obstoječimi sistemi ERP/LIMS, kar omogoča dvosmerni prenos receptur in rezultatov. Instrumente, naloge in uporabnike je mogoče upravljati centralno; Vodje laboratorijev lahko spremljajo napredek nalog v živo, ne da bi morali biti prisotni v laboratoriju. Za visoko regulirana okolja programska oprema pomaga pri skladnosti z zahtevami za celovitost podatkov FDA ALCOA +.
Ne glede na to, ali potrebujete le hitre in zanesljive meritve pH vrednosti ali morate izpolnjevati stroge predpise, vam lahko METTLER TOLEDO pomaga.
Vrhunska linija SevenExcellence ponuja intuitivno upravljanje z zaslonom na dotik OneClick™, ki omogoča zagon shranjenih metod neposredno iz bližnjice na začetnem zaslonu. Inteligentno upravljanje senzorjev zagotavlja, da so vaše pH elektrode vedno v vrhunskem stanju za natančne rezultate. Linijo Seven Excellence je mogoče povezati s laboratorijem LabX, da se zagotovita sledljivost in celovitost podatkov.
Za meritve pH na ravnih površinah, kot so agarske plošče, se priporočajo specializirane površinske elektrode, kot je InLab Surface Pro-ISM .
Ste si kdaj želeli, da bi bili postopki tehtanja in dokumentacije za formulacijo medijev manj zapleteni? Ali vam je znan izziv reprodukcije optimizirane formulacije medijev? Preberite naš vodnik in izvedite, kako lahko prilagojeni instrumenti, programska oprema in dodatna oprema pomagajo laboratorijem za raziskave in razvoj pri doseganju visoke stopnje zanesljivosti tehtanja, doslednosti medijev, splošne stroškovne učinkovitosti in kakovosti izdelkov za postopke formuliranja.
Da bi se izognili tveganju napak, je najboljši način za ponovni izračun napak elektronsko. Če so količine receptov na voljo v preglednici, lahko nove vrednosti hitro izračunate. Če uporabljate natančno tehtnico XPR, lahko nastavite metodo formulacije gojišča tako, da vas pozove, da vnesete zahtevano prostornino, ciljne količine pa se izračunajo samodejno. Stanje vas bo pozvalo k zahtevanim zneskom.
Dovoljena odstopanja za tehtanje je treba določiti v SOP za pripravo gojišča. Lahko se natančno navedejo ali navedejo v odstotkih. Če morate spremeniti prostornino recepta, obstaja dodaten izziv ponovnega izračuna tudi zgornje in spodnje omejitve teže, povezane z tolerancami. Pri natančnih tehtnicah XPR so dovoljena odstopanja vključena v odstotek, ko je ustvarjen recept za gojišča. Zgornja in spodnja meja teže se izračunata samodejno za vsako ciljno prostornino. Vgrajen vodnik za tehtanje vam pomaga pri odmerjanju do cilja in prikazuje zeleno, če ste v območju tolerance.
Najpreprostejši način je, da organizirate sestavine rastnih medijev glede na seznam in jih odkljukate eno za drugo, ko jih dodajate. Vendar pa je treba ta postopek skrbno izvajati, da bi se izognili napakam. Če shranite SOP gojišča kot metodo na tehtnico XPR, vas bo tehtnica pozvala k izbiri vsake sestavine po imenu in z zahtevano količino. Ko stehtate sestavino, se rezultat teže in ime sestavine samodejno shranita v vgrajeni protokol rezultatov, ki si ga lahko kadar koli ogledate. Tehtnica se samodejno tarira in vas pozove k naslednji sestavini.
Na naših tehtnicah XPR se teže sestavin gojišča samodejno shranijo v vgrajeni protokol rezultatov in si jih je mogoče kadar koli ogledati. Končne rezultate lahko natisnete ali prenesete na računalnik.
Najboljša tehtnica je odvisna od vaše aplikacije in vaših zahtev glede natančnosti. Pri izbiri tehtnice morate upoštevati:
V meroslovnem smislu so ti premisleki potrebni za opredelitev zahteve glede najmanjše mase, zmogljivosti tehtnice in varnega območja tehtanja. Brezplačna storitev priporočil GWP® podjetja METTLER TOLEDO vam pomaga izbrati pravo tehtnico za vaše potrebe in določiti, ali je vaša obstoječa tehtnica primerna za svoj namen.
Tehtnice XPR vključujejo funkcije zagotavljanja kakovosti, tako da ste lahko prepričani, da je tehtnica livelirana in da so rutinski preskusi posodobljeni, preden začnete tehtati. Stanje tehtnice je označeno s statusno lučko,™ vgrajeno na sprednji strani terminala za tehtnici. Na prvi pogled lahko vidite, da zelena pomeni, da je varno tehtati, rumena je opozorilo, napake pa so prikazane rdeče.
Vgrajena rutinska testna knjižnica vsebuje prilagodljive predloge za teste ekscentričnosti, ponovljivosti in občutljivosti. Vodi se evidenca vseh rutinskih preskusov, da se zagotovi sledljivost.
Laboratorijska programska oprema LabX zagotavlja največjo podporo za skladnost s predpisi. Z uvedbo SOP v LabX ste lahko prepričani, da vsi uporabniki upoštevajo enake postopke priprave gojišča. Programska oprema lahko upravlja tudi vse funkcije zagotavljanja kakovosti, vključno z načrtovanjem rutinskih testov in blokiranjem uporabe tehtnice, če je to potrebno. Vsi rezultati in informacije o postopku so varno shranjeni v centralni bazi podatkov, da se zagotovi sledljivost in pomaga pri skladnosti s FDA CFR del 11.
Če se tehtnica ne umiri, obstaja velika verjetnost, da na tehtnico vplivajo elektrostatični naboji ali zračni prepih.
Elektrostatični naboji se lahko kopičijo na posodah in vzorcih z običajnim ravnanjem, tako da ne delate nič narobe. Včasih se tehtnica lahko umiri, vendar vrednost teže, prikazana na tehtnici, morda ni resnična količina dodane snovi, kar bi lahko pojasnilo, zakaj je obnovljivost slaba. Za odstranitev elektrostatičnega naboja iz posod in vzorcev lahko poleg tehtnice namestite prostostoječe ionizatorje.
Težave z reševanjem lahko nastanejo tudi zaradi uporabe varnostne omare ali digestora.
V takih okoljih lahko turbulentni ali laminarni zračni prepihi delujejo s silo na tehtnico, kar preprečuje usedanje tehtnice in vpliva na ponovljivost.
Tehtalna posoda SmartPan na preciznih tehtnicah XPR zmanjša učinke prepiha zraka na tehtnico. SmartPan zagotavlja večjo stabilnost kot standardna tehtnica, kar omogoča do dvakrat hitrejše doseganje rezultatov in izboljša ponovljivost.
Tehtnice XPR vključujejo funkcije za konfiguracijo vzorčnih nalepk z vsemi zahtevanimi informacijami, vključno s samodejnim izračunom datuma izteka roka uporabnosti. Dodati lahko tudi črtne kode. Etiketa se lahko natisne samodejno na koncu postopka priprave gojišča. Nalepke METTLER TOLEDO prenesejo temperature v postopkih sterilizacije v avtoklavu.
Dobra ideja je, da na sestavine vključite nalepke s črtno kodo, da edinstveno identificirate vsak vzorec. Tehtnice XPR podpirajo bralnike črtnih kod; črtna koda sestavine se optično prebere, preden jo dodate v mešanico gojišča, tako da je enostavno preveriti, ali imate pravo sestavino. Če tehtnico XPR povežete s laboratorijem LabX, se prikaže opozorilo, če ponovno optično preberete isto črtno kodo, tako da iste sestavine ni mogoče dodati dvakrat.
Laboratorijsko programsko opremo LabX je mogoče enostavno integrirati s sistemom LIMS in omogočiti dvosmerni prenos informacij med sistemom LIMS in instrumenti, povezanimi s sistemom LabX, vključno z tehtnico, ki se uporablja za pripravo gojišča.
