Odlingsmedier är specifika blandningar av näringsämnen och andra ämnen som stöder tillväxten av mikroorganismer som bakterier och svampar (jäst och mögel). Odlingssubstrat används för kvalitetskontrolltester av icke-sterila råvaror och färdiga produkter samt för mikrobiella kontamineringstester (sterilitet) i tillämpningar som hygienövervakning, validering av steriliseringsprocesser och bestämning av effektiviteten hos konserveringsmedel och antimikrobiella medel.
Mikrobiella uppräkningstester för icke-sterila produkter utförs enligt de harmoniserade testprocedurerna i de europeiska, amerikanska och japanska farmakopéerna. Dessa tester, tidigare kända som Microbial Limit Tests (MLT), bestämmer biobelastningen av produktprovet. Detta uppnås genom att räkna antalet kolonibildande enheter som har vuxit på odlingsmediet för en känd provstorlek (CFU/g). Acceptanskriterierna är baserade på det totala aeroba mikrobiella antalet (TAMC), det totala antalet jäst och mögel (TYMC). Dessutom utförs särskilda tester för att bekräfta närvaron eller frånvaron av vissa mikroorganismer som kan visa sig vara stötande.
Ingredienserna i odlingsmediet varierar beroende på vilket test som utförs och vilken mikroorganism som är av intresse. Vanligast är att odlingsmedier är baserade på en näringsbuljong (flytande), ofta blandad med agar och tillagad i petriskålar (de kan vara halvfasta eller fasta). För berikade eller selektiva medier läggs ytterligare specifika komponenter till.
Beredning av odlingssubstrat måste utföras noggrant för att säkerställa att mikrobiologisk tillväxt främjas korrekt. De enskilda ingredienserna i odlingssubstrat (pulver, geler och vätskor) måste vägas noggrant upp i enlighet med receptet för odlingssubstratets formulering. En precisionsvåg med läsbarhet från 1 mg upp till 10 mg används vanligtvis för huvudkomponenterna. En analysvåg kan behövas för att väga upp spårämnen som koppar och zink. Om det krävs en mindre mängd odlingsmedier måste man vara noga med att räkna om ingrediensmängderna korrekt och en våg med högre läsbarhet kan krävas för att uppfylla kraven på noggrannhet.
Noggrann förberedelse av odlingsmedier är avgörande för att säkerställa att mikrobiologisk tillväxt stöds korrekt. Titta på videon för att se hur METTLER TOLEDO:s XPR-precisionsvågar inte bara hjälper till att säkerställa att dina odlingsmedier formuleras exakt, utan också förenklar processen för att spara tid och ansträngning.
Beredning av odlingssubstrat, inklusive flytande odlingssubstrat och odlingssubstrat baserade på näringsagar, är en vanlig procedur i alla mikrobiologiska laboratorier. Processen för att formulera odlingsmedier omfattar många steg och måste utföras med försiktighet för att undvika korskontaminering och i slutändan skydda konsumenternas hälsa.
Beroende på typ av produkt och dess syfte finns det tre huvudkategorier av mikrobiella kvalitetskontrolltester som kräver användning av odlingsmedier:
| Typ av produkttest | Avsikt | |
|---|---|---|
| Icke-steril | Mikrobiella uppräkningstester | Räknar det totala antalet bakterier och/eller svampar i ett produktprov |
| Icke-steril | Tester för specifika organismer | Identifierar stötande organismer, t.ex. salmonella, i ett produktprov |
| Steril | Tester av sterilitet | Kontrollerar steriliteten hos ett produktprov |
Testprocedurerna för mikrobiella gränsvärden utförs för att avgöra om en icke-steril produkt uppfyller givna specifikationer för mikrobiell kvalitet. Sådana icke-sterila produkter inkluderar kosmetiska, hälsovårds- och farmaceutiska produkter som kan förtäras, appliceras lokalt eller inhaleras. Effektiviteten hos sådana produkter kan påverkas eller till och med elimineras av närvaron av vissa mikroorganismer, och dessutom kan vissa mikroorganismer ha en negativ inverkan på konsumentens hälsa. De mikrobiella uppräkningstesterna är en rad tester som tillverkare kan använda för att säkerställa att biobelastningen av deras färdiga varor håller sig inom säkra gränser.
Medan många länder har sina egna riktlinjer för att fastställa säkerheten för icke-sterila produkter, finns det en harmonisering av de viktiga standarderna på de europeiska, amerikanska och japanska marknaderna, vilket visas i tabellen nedan.
| Europeiska farmakopén (EP) | US farmakopé (USP) | Japanska farmakopén (JP) |
|---|---|---|
| 2.6.12: Mikrobiell undersökning av icke-sterila produkter: Mikrobiella uppräkningstester | <61>: Mikrobiell undersökning av icke-sterila produkter: Mikrobiella uppräkningstester | 4.05 I: Mikrobiell undersökning av icke-sterila produkter: Mikrobiella uppräkningstester |
| 2.6.13: Mikrobiell undersökning av icke-sterila produkter: tester för specifika mikroorganismer | <62>: Mikrobiell undersökning av icke-sterila produkter: tester för specifika mikroorganismer | 4.05 II: Mikrobiell undersökning av icke-sterila produkter: tester för specificerade mikroorganismer |
| 5.1.4: Mikrobiologisk kvalitet hos icke-sterila farmaceutiska preparat och substanser för farmaceutiskt bruk | <1111>: Mikrobiologisk undersökning av icke-sterila produkter: Acceptanskriterier för farmaceutiska preparat och substanser för farmaceutiskt bruk | 12: Mikrobiologisk undersökning av icke-sterila produkter: Acceptanskriterier för farmaceutiska preparat och substanser för farmaceutiskt bruk |
Sterilitetstestning bekräftar att produkter är fria från förekomst av viabla mikroorganismer och är av avgörande betydelse för medicintekniska produkter, läkemedel, vävnadsmaterial och alla andra material som påstår sig vara sterila eller fria från viabla mikroorganismer. Förutom att identifiera potentiell kontaminering används sterilitetstestning också för att fastställa antimikrobiell effektivitet och för att validera steriliseringsprocedurer.
| Europeiska farmakopén (EP) | US farmakopé (USP) | Japanska farmakopén (JP) |
|---|---|---|
| 2.6.1: Sterilitet | <71>: Sterilitetstester | 4.06: Sterilitetstest |
Buffertlösningar är mycket viktiga i ett brett spektrum av applikationer. Buffertförberedelse är dock tidskrävande och arbetskrävande och måste göras med försiktighet för att undvika fel. Om du behöver hjälp med buffertförberedelse eller vill ha råd om vilken våg som uppfyller dina krav på noggrannhet finns vårt team av experter här för dig. Tveka inte att kontakta oss för hjälp eller råd.
Odlingsmedier består ofta av fler än fem ingredienser, ibland så många som 30. Sådana komplexa formuleringsprocesser kräver stor omsorg och uppmärksamhet, och även den snabbaste laboratorieteknikern kan behöva 1,5 timme för att förbereda en sådan blandning.
Beräkning av odlingsmedier
Det typiska receptet för odlingsmedier ger 1 liter odlingsmedielösning. När en annan volym än 1 liter krävs är det nödvändigt att räkna om alla ingrediensmängder i enlighet med detta och registrera alla nya värden. Eventuella fel i beräkningarna eller i loggningen av de nya värdena kan resultera i ett odlingsmedium som inte fungerar som krävs, vilket kan leda till allvarliga konsekvenser.
Vägning och registrering av viktresultat
När man följer ett recept på odlingsmedier, eller de omräknade värdena, måste laboratorieteknikern vara säker på att rätt mängd av varje ingrediens används och att alla ingredienser faktiskt har tillsatts. Detta kan ofta innebära att man bockar av ingredienserna från en lista när de vägs in. Försiktighet måste iakttas för att undvika transkriptionsfel när du loggar de faktiska vikterna eller när du överför dem till en dator. Användningen av två balanser i förberedelseprocessen för kulturmedia ökar komplexiteten, minskar effektiviteten och ökar risken för fel.
Vägningens påverkan
Ingredienser till odlingsmedier kan vägas upp i en mängd olika behållare, allt från vågbåtar upp till femliters bägare. Alla behållare, liksom själva vågen, kan utsättas för yttre påverkan, t.ex. luftrörelser, elektrostatiska laddningar eller magnetfältet från en omrörare, vilket kan ge upphov till svårigheter som t.ex. att vågen täras, avdrift och instabila avläsningar och längre inställningstider. Sådana utmaningar förlänger tiden för att göra kulturen medial, vilket påverkar produktiviteten.
Svårigheterna med att väga i ett säkerhetsskåp eller dragskåp
Effekterna av luftens rörelse i ett säkerhetsskåp eller dragskåp kan lindras genom att använda en dragsköld för att skydda vågen och behållaren. Även om en dragsköld är ett utmärkt sätt att förhindra vägningsfel, finns det några praktiska nackdelar:
Dokumentation
odlingsmediet måste inte bara vara fullständigt märkt för att undvika förväxlingar, all data som är relaterad till odlingsmediet måste loggas och lagras på ett säkert sätt för framtida referens och spårbarhet. Att hantera stora mängder data manuellt är tidskrävande och medför en hög risk för fel.
METTLER TOLEDO:s XPR-precisionsvågar erbjuder en hög nivå av noggrannhet och löser många av utmaningarna med beredning av odlingsmedier, förenklar processer och minskar arbetsbelastningen för laboratorietekniker. Med läsbarhet från 0,1 mg till 100 mg och kapacitet upp till 10 kg är XPR-precisionsvågar perfekta för ett brett spektrum av tillämpningar för beredning av odlingsmedier.
Recept direkt på vågen
Upp till 50 recept för förberedelse av odlingsmedier kan sparas på vågen som vägningsmetoder, vilket gör det möjligt för tekniker att snabbt komma åt det recept som behövs och börja arbeta. Steg-för-steg-instruktioner finns på vågdisplayen så att det är enkelt för teknikerna att hålla reda på var de befinner sig i förberedelseprocessen för odlingsmedier.
Automatiska beräkningar och resultatlagring
I början av odlingsmediereceptet anger teknikern helt enkelt den nödvändiga volymen och mängderna av ingredienserna räknas om automatiskt. Vågen uppmanar teknikern att väga in varje ingrediens, sparar det faktiska viktresultatet och rensar automatiskt innan nästa ingrediens tillsätts. Det finns inget behov av att registrera resultat manuellt och resultaten kan skrivas ut automatiskt i slutet.
Inget dragskydd behövs
Alla XPR-precisionsvågar är utrustade med SmartPan-vågskålen™. SmartPan ger extraordinär stabilitet genom att minimera effekterna av luftströmmar på vägningscellen, vilket gör det möjligt att väga in med 1 mg läsbarhet utan dragskydd. SmartPan gör det möjligt att leverera resultat upp till dubbelt så snabbt som en vanlig vågskål.
Enkel rengöring
Ren utrustning är avgörande för att minska risken för korskontaminering. SmartPan-vågskålen håller kvar eventuellt spill på trågets botten, vilket möjliggör säker kassering. Plattan och botten tas enkelt bort för rengöring i diskmaskin. Ett skyddshölje på kroppen skyddar inte bara vågen genom att förhindra att spill kommer in i vägningscellen, utan den släta ytan är lätt att rengöra och förhindrar ansamling av smuts. Det finns kemiskt resistenta lock för vågdisplayen som enkelt kan lyftas av efter användning och kasseras för att undvika korskontaminering.
METTLER TOLEDO:s XPR-precisionsvågar kan anslutas till vår egenutvecklade laboratorieprogramvara LabX för att skapa en komplett arbetsflödeslösning som erbjuder omfattande datahanteringsfunktioner. En centraliserad databas ger alla anslutna användare tillgång till samma SOP:er för förberedelse av odlingsmedier, vilket säkerställer att varje tekniker följer samma procedurer. Programvaran tar hand om all processinformation och beräkningar automatiskt. Resultaten sparas på ett säkert sätt i databasen och kan nås när som helst för vidare analys och rapportgenerering. Programvaran eliminerar praktiskt taget behovet av manuell registrering av data – även detaljerade etiketter kan skrivas ut automatiskt.
Lösningen kan integreras med befintliga ERP/LIMS-system, vilket möjliggör dubbelriktad överföring av recept och resultat. Instrument, uppgifter och användare kan alla hanteras centralt; Laboratoriechefer kan övervaka hur uppgifterna fortskrider i realtid utan att behöva vara närvarande i laboratoriet. För starkt reglerade miljöer hjälper programvaran till att uppfylla FDA:s ALCOA+-krav på dataintegritet.
Oavsett om du bara behöver snabba och tillförlitliga pH-mätningar eller måste uppfylla stränga regler kan METTLER TOLEDO hjälpa dig.
Toppmodellen SevenExcellence erbjuder intuitiv OneClick-pekskärm™, vilket gör det möjligt att starta sparade metoder direkt från en genväg på startskärmen. Intelligent sensorhantering säkerställer att dina pH-elektroder alltid är i toppskick för exakta resultat. Seven Excellence-linjen kan anslutas till LabX för att säkerställa spårbarhet och dataintegritet.
För pH-mätningar på plana ytor som agarplattor rekommenderas specialiserade ytelektroder som InLab Surface Pro-ISM .
Har du någonsin önskat att invägnings- och dokumentationsprocesser för odlingsformulering var mindre komplicerade? Känner du igen utmaningen att reproducera optimerad odlingsformulering? Läs vår guide och lär dig hur skräddarsydda instrument, programvara och tillbehör kan hjälpa FoU-laboratorier att uppnå en hög grad av vägningstillförlitlighet, mediekonsistens, övergripande kostnadseffektivitet och produktkvalitet för sina formuleringsprocesser.
För att undvika risken för fel är det bästa sättet att räkna om fel elektroniskt. Om receptmängderna är tillgängliga i ett kalkylblad kan de nya värdena beräknas snabbt. När du använder en XPR-precisionsvåg kan du ställa in din metod för formulering av odlingsmedier så att du uppmanas att ange den volym som krävs och målbeloppen kommer att beräknas automatiskt. Vågen kommer att be dig om de belopp som krävs.
Vägningstoleranserna bör definieras i din förberedelse av odlingsmedia SOP. De kan anges exakt eller anges i procent. Om du behöver ändra receptvolymen finns det ytterligare en utmaning att även räkna om de övre och nedre viktgränserna relaterade till toleranserna. Med XPR precisionsvågar ingår toleranserna i procent när receptet på odlingsmediet skapas. De övre och nedre viktgränserna beräknas automatiskt för alla målvolymer. Den inbyggda invägningsguiden hjälper dig att dosera till målet och visar grönt om du ligger inom toleransområdet.
Det enklaste sättet är att organisera dina odlingsmedieingredienser enligt listan och bocka av dem en efter en när du lägger till dem. Denna process måste dock utföras noggrant för att undvika misstag. Genom att spara din odlingsmedia SOP som en metod på din XPR-våg, kommer vågen att fråga dig efter varje ingrediens efter namn och med den mängd som krävs. När du har vägt ingrediensen sparas viktresultatet och ingrediensens namn automatiskt i det inbyggda resultatprotokollet som du kan se när som helst. Vågen tarerar automatiskt och frågar efter nästa ingrediens.
På våra XPR-vågar sparas vikterna för odlingsmedieingredienserna automatiskt i det inbyggda resultatprotokollet och kan ses när som helst. De slutliga resultaten kan skrivas ut eller överföras till en dator.
Den bästa vågen beror på din applikation och dina noggrannhetskrav. När du väljer din våg måste du tänka på:
I metrologiska termer är dessa överväganden nödvändiga för att definiera minimikravet på vikt, vågens kapacitet och det säkra vägningsområdet. METTLER TOLEDO:s kostnadsfria tjänst GWP-rekommendation® hjälper dig att välja rätt våg för dina behov och avgör om din befintliga våg är lämplig för ändamålet.
XPR-vågar har kvalitetssäkringsfunktioner så att du kan vara säker på att vågen är jämn och att rutintesterna är uppdaterade innan du börjar väga. Vågens status indikeras av statuslampan™ som är inbyggd i vågterminalens framsida. Vid en första blick kan du se att grönt betyder att det är säkert att väga, gult är en varning och fel visas i rött.
Det inbyggda rutintestbiblioteket innehåller anpassningsbara mallar för excentricitets-, repeterbarhets- och känslighetstester. Ett register över alla rutintester upprätthålls för att ge spårbarhet.
LabX laboratorieprogramvara ger maximalt stöd för regelefterlevnad. Genom att implementera dina SOP:er i LabX kan du vara säker på att alla användare följer samma procedurer för förberedelse av kulturmedier. Programvaran kan också hantera alla kvalitetssäkringsfunktioner, inklusive schemaläggning av rutintester och blockering av vågen från användning vid behov. Alla resultat och processinformation sparas säkert i en central databas för att säkerställa spårbarhet och hjälpa till med efterlevnad av FDA CFR del 11.
När en våg inte sätter sig finns det en stor chans att vägningscellen påverkas av elektrostatiska laddningar eller luftdrag.
Elektrostatiska laddningar kan byggas upp på behållare och prover genom normal hantering så att du inte gör något fel. Ibland kan vågen sätta sig, men viktvärdet som visas på vågen kanske inte är den verkliga mängden av det tillsatta ämnet, vilket kan förklara varför reproducerbarheten är dålig. För att ta bort elektrostatiska laddningar från dina behållare och prover kan fristående jonisatorer placeras bredvid din våg.
Svårighet med att lösa problem kan också uppstå vid användning av ett säkerhetsskåp eller dragskåp.
I sådana miljöer kan luftdrag med turbulent eller laminärt flöde utöva en kraft på vägningscellen som hindrar vågen från att sätta sig och påverka repeterbarheten.
SmartPan-vågskålen på XPR-precisionsvågar minimerar effekterna av luftdrag på vägningscellen. SmartPan ger högre stabilitet än en vanlig vågskål, vilket gör att resultaten kan levereras upp till dubbelt så snabbt och förbättra repeterbarheten.
XPR-vågen innehåller funktioner för att konfigurera provetiketter med all information du behöver, inklusive automatisk beräkning av utgångsdatum. Även streckkoder kan läggas till. Etiketten kan skrivas ut automatiskt i slutet av förberedelsen av odlingsmediet. METTLER TOLEDO-etiketter klarar temperaturerna i autoklavsteriliseringsprocesser.
En bra idé är att inkludera streckkodsetiketter på dina ingredienser för att unikt identifiera varje prov. XPR-vågen stöder streckkodsläsare; Ingrediensens streckkod skannas innan den läggs till i odlingsmedieblandningen så det är enkelt att kontrollera att du har rätt ingrediens. Genom att koppla din XPR-våg till LabX kommer en varning att ges om du skannar samma streckkod igen så det är inte möjligt att lägga till samma ingrediens två gånger.
LabX laboratorieprogramvara integreras enkelt med din LIMS för att möjliggöra dubbelriktad överföring av information mellan din LIMS och de instrument som är anslutna till LabX, inklusive eventuell våg som används för beredning av odlingsmedia.
