Good Pipetting Practice를 통한 데이터 개선

증기압이 높은 액체는 공기에 너무 오랫동안 노출되면 급격한 농도 변화를 일으킬 수 있습니다. 팁을 미리 적시고 빠르게 작업하며 가능하면 용기에 뚜껑을 닫으십시오. 역방향 피펫팅 옵션을 포함한 일관된 흡인 기술은 부피를 안정화하는 데 도움이 될 수 있습니다.

용적식 피펫에는 에어 갭이 없기 때문에 증기압이 높은 액체에서 더 정확합니다. 따라서 응용 분야에 정확성이 중요한 경우 권장됩니다. 

올바른 피펫 을 선택하려면 요구 사항을 평가해야 합니다. 첫째, 어떤 종류의 샘플을 피펫팅하고 있습니까? 그들은 수성입니까? 아니면 점성이 있거나, 휘발성이거나, 거품이 있거나, 부식성이 있거나, 위험합니까? 수성 및 수성에 가까운 액체의 경우 가장 일반적인 공기 치환 피펫("에어 쿠션" 피펫이라고도 함)이 좋은 선택입니다. 점성, 휘발성 및 기타 특이한 액체 유형의 경우 정확성과 안전성 모두에서 용적식 피펫이 더 나은 선택이 될 것입니다. 

어떤 양의 피펫팅을 할 것입니까? 한 용기에서 다른 용기로 이송하는 데 필요한 샘플 수는 몇 개입니까? 피펫 선택에 대한 이 백서 를 확인하여 액체 및 상황에 맞는 기타 요인에 따라 어떤 피펫이 가장 효과적인지 이해하십시오.

미세유체 분석은 타협하지 않는 정확성을 요구합니다. 피펫팅 손을 안정화하고, 초저용량용으로 설계된 고품질 팁을 사용하고, 일관성 향상을 위해 역방향 피펫팅을 고려하십시오. 온도와 같은 환경 요인 제어와 함께 정기적인 교정은 이러한 규모에서 정확성을 지원합니다. 

정교하게 설계된 마이크로 볼륨 팁과 결합된 Rainin 피펫은 최첨단 미세유체 실험에서 탁월한 결과를 얻는 데 필요한 정확하고 안정적인 제어 기능을 제공합니다.

다중 채널 피펫으로 두꺼운 용액을 피펫팅할 때 기포로 인해 부피 오류가 발생하고 측정이 복잡해집니다. 기포의 위험을 줄이려면 천천히 2-3회 흡인하고 분배하여 팁을 미리 적십니다. 그런 다음 천천히 흡인하여 공기 주머니를 줄이기 위해 팁이 드로우 내내 완전히 잠기도록 합니다. 역방향 피펫팅은 기포가 발생하기 쉬운 샘플에서 추가적인 제어를 제공할 수 있습니다. 

용적식 피펫에는 에어 갭이 없기 때문에 기포가 정확도에 영향을 미칠 가능성이 적습니다. 기포를 형성하는 액체의 많은 분취량을 피펫팅할 때 Nanorep 과 같은 전자 중계기 피펫은 문제를 방지하는 데 도움이 됩니다. 수동 용적식 피펫은 정확도가 중요한 저처리량 실험에도 유용합니다.

흡인할 때 피펫을 가능한 한 수직에 가깝게 잡고 Y축에서 20°보다 큰 각도를 피하십시오. 디스펜싱할 때 팁에서 모든 액체를 완전히 당기기 위해 대상 용기의 벽을 터치하는 경우 20° 각도를 초과해도 괜찮습니다.

포워드 피펫팅은 표준 피펫팅 기술이며 수성 샘플에 가장 적합한 선택입니다. 점성 및 휘발성 시료의 경우 역방향 피펫팅이 더 나은 정확도를 제공합니다.

피펫을 앞으로 이동하려면 피펫을 액체 외부에 대고 있는 상태에서 플런저를 첫 번째 정지 지점까지 아래로 밉니다. 그런 다음 팁을 작업 중인 액체에 2-10mm 깊이로 담그십시오. 플런저를 완전히 확장할 때까지 천천히 풀어 전체 액체 부피를 흡인합니다. 대상 용기에 분배하려면 피펫을 용기 안으로 이동한 다음 플런저를 첫 번째 정지 지점까지 두 번째 정지 지점까지 플런저를 균일한 속도로 누릅니다. 플런저를 완전히 누른 상태에서 피펫 끝을 용기 벽 위로 가볍게 드래그하여 "터치오프"합니다. 이렇게 하면 전체 액체 부피를 완전히 분배하는 데 도움이 됩니다. 플런저를 풀고 피펫 팁을 꺼낸 다음 새 피펫 팁을 넣은 다음 반복합니다.

피펫을 리버스하려면 플런저를 첫 번째 정지 지점을 통해 두 번째 정지 지점까지 플런저를 끝까지 밀어 넣습니다. 그런 다음 팁을 액체에 담그고 플런저를 천천히 고르게 풀어 흡인합니다. 수용 용기로 이동하고 플런저를 첫 번째 정지까지만 눌러 올바른 부피를 분배합니다. 피펫 팁에는 작은 잔류 부피가 남아 있습니다. 피펫을 폐기 분배 용기 위로 옮기고 플런저를 나머지 부분까지 "분출" 정지라고도 하는 두 번째 정지 지점까지 눌러 남아 있는 액체를 배출합니다. 

플런저를 풀고 피펫 팁을 꺼낸 다음 새 피펫 팁을 넣은 다음 반복합니다.

피펫팅 기술에 대한 더 많은 팁을 찾고 계십니까? 지금 바로 실험실에 유용한 포스터 를 받으세요! 

공기 치환 피펫 은 혈액을 포함하여 약간 점성이 있는 액체를 피펫팅하는 데 사용할 수 있습니다. 최대 정확도를 얻으려면 위에서 설명한 역방향 피펫팅 기술을 사용하십시오. 85% 글리세롤 또는 Triton X-100과 같은 점성이 높은 액체의 경우 용적식 피펫이 최고의 정확도와 일관성을 제공합니다.

에탄올과 같은 약간 휘발성이 있는 액체는 위에서 언급한 역피펫팅 기술을 사용하여 공기 치환 피펫으로 피펫팅할 수 있습니다. 그러나 휘발성 액체에는 용적식 피펫이 더 나은 선택입니다. 

공기 치환 피펫을 사용하는 경우 피펫 팁을 피펫팅하기 전에 최소 5회 미리 헹구십시오(흡인 및 분배). 이는 피펫 내부의 공기를 평형화하여 액체의 증발 속도를 늦춥니다. 휘발성 액체의 빠른 증발은 피펫 내부의 공기를 팽창시키고 플런저에 압력을 가하지 않고 팁에서 액체를 강제로 배출하여 정확한 부피 전달을 감소시킵니다.

아세토니트릴과 같은 휘발성 액체는 일반적으로 용적식 피펫으로 더 잘 처리됩니다.

예, 공기 치환 피펫으로 피펫팅하면 에어로졸이 생성될 수 있습니다. 에어로졸은 피펫 내부로 상승하여 내부 벽과 피스톤을 오염시킬 수 있습니다. 에어로졸화는 흡인 중에 플런저가 너무 빨리 풀릴 때 더 쉽게 발생하며 지나치게 빠른 분배로 피펫 외부의 반대 방향으로도 발생할 수 있습니다. 

에어로졸을 최소화하려면 천천히 고르게 흡인하고 분배하십시오. 필터링된 팁을 사용합니다. 

용적식 피펫은 에어로졸화를 방지하는 주사기 스타일 팁을 사용합니다. 용적식 피펫은 위험한 액체와 점도 또는 휘발성이 높은 액체를 피펫팅하는 데 가장 적합한 선택입니다.

매우 차갑거나 뜨거운 액체는 공기 치환 피펫 내의 공기압을 변화시켜 피펫팅이 부정확해집니다. 

액체와 피스톤 사이에 에어 포켓이 없는 주사기 스타일 팁이 있는 용적식 피펫은 액체의 다양한 온도에 영향을 받지 않습니다. 용적식 피펫은 실온이 아닌 액체로 정확한 결과를 제공합니다.

공기 치환 피펫으로 매우 뜨겁거나 차가운 액체를 피펫팅해야 하는 경우 피펫 팁을 미리 헹구지 마십시오. 대신, 액체 온도가 피펫 내부 공극에 미치는 영향을 최소화하기 위해 신속하게 흡인 및 분배하십시오.

피펫팅 시 기포와 거품이 발생하지 않도록 팁을 액체 저장소에 10mm 이상 담그지 말고 천천히 흡인하십시오.

역방향 피펫팅은 흡인하기 전에 플런저를 2번째 정지 지점까지 완전히 누르기 때문에 액체 샘플에 공기를 주입할 가능성이 없기 때문에 추가적인 보호 기능을 제공합니다. 역방향 피펫팅에 대한 자세한 내용은 이 페이지를 참조하십시오. 

용적식 피펫은 주사기 스타일의 팁이 액체가 상호 작용할 공기를 제공하지 않기 때문에 액체와 상호 작용할 때 기포나 거품을 생성하지 않습니다.

젖은 천과 이소프로판올 또는 10% 표백제 용액과 같은 세제로 피펫을 닦아 오염을 제거하십시오. 마이크로미터의 투명한 플라스틱 창을 피하십시오.

오토클레이브는 또 다른 옵션일 수 있지만 피펫의 기기 사양을 확인하십시오. 고압멸균이 가능한 경우 전체 기기가 고압멸균됩니까, 아니면 액체 끝만 고압멸균됩니까?  종종 액체 끝만 고압멸균할 수 있습니다.

피펫 세척에 대한 자세한 내용은 피펫 세척 포스터를 참조하십시오.

반응성 화학 물질은 주의해서 다루어야 합니다. 신선하고 불활성인 팁을 사용하고 피펫 외부에 정기적으로 에탄올을 뿌려 튀김과 잔여물을 제거합니다. 팁이 표면에 닿지 않도록 하고 피펫 팁 을 자주 전환 하여 교차 접촉을 방지하십시오.

안전한 팁 맞물림과 부드러운 플런저 제어 로 널리 알려진 Rainin 피펫 은 까다로운 반응성 시약으로 작업할 때에도 안전하고 오염 없는 이송을 지원합니다.

피펫 정확도(또는 현재 진실성이라고 함)는 모든 측정값(4-10회 측정)의 평균 부피와 설정된 부피 간의 차이입니다. 피펫의 정밀도를 논의할 때 이는 수행된 모든 측정의 표준 편차로 설명됩니다. 

피펫의 불확실성은 전반적인 정확도에 대한 정량적 용어입니다. 이는 진실성(체계적 오류의 척도)과 정밀도(무작위 오류의 척도)의 조합입니다. 

불확실성에 대한 방정식은 다음과 같습니다. 

불확실성 = 체계적 오차 + 무작위 오차 * k. k(커버리지 계수 또는 Z-점수)는 측정 횟수에 따라 다릅니다. k=3.31은 4회 측정, 2는 10회 측정.

피펫 불확도 및 정확성 보장에 대한 자세한 내용은 이 백서를 다운로드하십시오.