Pipety

Existují dva typy pipet: pipety s přímým posunutím a pipety se vzduchem. Pipety s přímým posunutím se běžně používají pro vzorky s vysokou viskozitou (např. glycerol) nebo vysokým tlakem par (např. těkavé látky, jako je alkohol), zatímco pipety se vzduchovým polštářem lze použít pro většinu laboratorních aplikací.

Moderní pipety, známé také jako mikropipety, pracují na principu zdvihu pístu – kapalina se měří pomocí systému píst-válec v rukojeti pipety. Když je píst stlačen a poté pomalu uvolněn, pohyb pístu vytváří podtlak ve špičce pipety a tím nasává kapalinu dovnitř špičky; což se nazývá aspirace.

Vzhledem k tomu, že píst v pipetě je daleko od kapalného vzorku, může mít vzduchový polštář mezi pístem a kapalinou řadu vlivů na přesnost tohoto procesu v závislosti na typu kapaliny. Stisknutím pístu, který má špičku plnou kapaliny, vytlačíte kapalinu ze špičky; Tomu se říká dávkování.

Pipety s přímým posunutím fungují na podobném principu, ale špička systému s přímým posunutím obsahuje vlastní píst, a proto je mezi pístem (který je součástí špičky) a hladinou kapaliny minimální vzduchový polštář.

Přesnost pipetování je schopnost pipety dodávat objem specifikovaný v nastavení objemu. Jinými slovy, pravdivost měření vůči skutečné hodnotě závisí na souhře prvků v systému.

Preciznost pipetování je schopnost pipety konzistentně dodávat stejně velké objemy kapaliny po více alikvotech. Pipeta může být přesná, pokud jde o dávkování stejného objemu znovu a znovu, ale nepřesná, protože nedokáže dávkovat správný objem. Přesná a přesná pipeta dávkuje při každém dávkování objemy v zamýšleném objemu.

Pipeta, špička pipety a osoba obsluhující pipetu tvoří 3dílný systém. Obsluha pipety, tedy osoba používající pipetu k provádění výzkumu, má vysoký stupeň vlivu na přesnost výsledků. Proto je důležité, aby byla obsluha vyškolena v používání pipety. Některé výkonné, ale jednoduché techniky mohou přesnost pipetování výrazně zlepšit. Plakát Rainin o pipetovací technice nabízí dobré shrnutí. Společnost Rainin navíc nabízí online seminář Správná pipetovací praxe, který vám pomůže naučit se správně pipetovat.

Rainin nabízí širokou škálu manuálních a elektronických jednokanálových, vícekanálových nebo velkokapacitních pipetovacích přístrojů a kalibračních služeb, které zajistí, že vaše výsledky zůstanou přesné. Pipety Rainin jsou k dispozici po celém světě. Máte zájem o koupi pipety? Vyžádejte si cenovou nabídku v horní části této stránky.

Kolik pipeta stojí, závisí na typu pipety: jednokanálová nebo vícekanálová, manuální nebo elektronická. Cena pipet se liší v závislosti na přesnosti (specifikace přesnosti), materiálech a řemeslném zpracování.

Pipety se používají v laboratořích po celém světě, včetně laboratoří zapojených do experimentů v oblasti biologických věd, chemického testování, ropy a výroby potravin. Používají se v každém odvětví, které má biologické testování jako požadavek.

Při výběru vhodné pipety pro daný úkol zvažte několik faktorů: typ kapaliny, počet opakování, časovou citlivost a objem pipetování.

Za prvé, jaký typ kapaliny pipetujete?

• Pipeta se vzduchovým polštářem bude dobře fungovat, pokud je kapalina vodná nebo téměř vodná.
• Pokud je kapalina viskózní nebo těkavá, pipeta s přímým posunutím poskytne lepší výsledky než pipeta se vzduchovým polštářem.
• Pipety se vzduchovým polštářem mají uvnitř vzduch, který lze při práci s viskózními kapalinami natáhnout nebo stlačit nebo rozšířit rychlým odpařením těkavé kapaliny do vnitřní komory pipety.
• Pipety s přímým posunutím mají píst, který sahá až k otvoru špičky podobné stříkačce. Tím se zachovává přesnost pipetování odstraněním vzduchu ze systému. 

Typ nádob zahrnutých do vaší aplikace a počet opakování jsou také rozhodujícími faktory při výběru pipety.

• Ruční jednokanálová pipeta je vhodná pro malý počet dávek do většiny zkumavek a destiček. Pokud však pipetujete do mnoha jamek nebo zkumavek, vícekanálové pipety a elektronické pipety mohou snížit zátěž pipetovací ruky.
• Vícekanálové pipety efektivně plní řady destiček a verze s nastavitelnou roztečí poskytují pohodlný způsob, jak přecházet mezi nádobami s různými rozestupy, jako jsou zkumavky a destičky.
• Elektronické pipety také nabízejí další výhodu v podobě dávkování více alikvotů z jedné aspirace – a to i v sekvenci různých objemů. A díky počítadlu cyklů vám elektronické pipety pomohou sledovat, kde se ve svém protokolu nacházíte.
• Zvažte vysoce výkonnou poloautomatickou pipetovací pracovní stanici, pokud zamýšlený počet replik vyplní více destiček.

Pokud je váš protokol časově citlivý, zvažte použití vícekanálových pipet a vysoce výkonných pipetovacích platforem, které vám pomohou dosáhnout co nejvíce, v co nejkratším čase. Elektronické verze těchto přístrojů mohou přinést nejvýznamnější úsporu času.

Jaký objem pipetujete?

• Pro dosažení přesných výsledků pracujte mezi 10 až 100 % jmenovitého objemu pipety.
• Objemy blízké plnému jmenovitému objemu pipety zajistí nejvyšší přesnost.
• Vyhněte se pipetování 20 μl pomocí pipety o objemu 1 000 μl. Místo toho pipetujte 20 μl pomocí pipety o objemu 20 μl.
• Velikost pipet se pohybuje od 1 μl až po 20 ml a pomocí sérologických pipet lze přesně přenášet i větší objemy.  

Křížová kontaminace může zmařit experimenty, proto přijměte přísné zásady změny hrotu – jedna špička na vzorek. Filtrované špičky blokují aerosoly a pravidelným otíráním pipety ethanolem se odstraňují povrchové zbytky. Udržování čistého a uspořádaného stolu a správné skladování pipet toto úsilí posilují. Vícekanálové pipety Rainin díky bezpečnému uchycení špičky a pohodlné manipulaci usnadňují dodržování těchto postupů a zajišťují, že každý přenos vzorku je izolovaný a bez kontaminace.

Při nízkých objemech může i nepatrná kapka zbytkového činidla zkreslit výsledky. Buďte pečliví při výměně špiček mezi jednotlivými činidly a zvažte použití filtrovaných špiček, abyste zabránili kontaminaci těla pipety aerosoly. Udržujte pipetu bez zbytků pravidelným otíráním etanolem. Laboratorní pipety Rainin s pipetovacími špičkami, které konzistentně sedí a vysouvají se hladce s minimální silou, usnadňují dodržování přísných standardů čistoty každého nového činidla, se kterým manipulujete.