Kultivační média, známá také jako růstová média, jsou specifické směsi živin a dalších látek, které podporují růst mikroorganismů, jako jsou bakterie a houby (kvasinky a plísně). Kultivační média se používají pro testy kontroly kvality nesterilních surovin a hotových výrobků, jakož i pro testy mikrobiální kontaminace (sterility) v aplikacích, jako je monitorování hygieny, validace sterilizačního procesu a stanovení účinnosti konzervačních látek a antimikrobiálních látek.
Testy mikrobiálního počtu nesterilních produktů se provádějí podle harmonizovaných zkušebních postupů evropského, amerického a japonského lékopisu. Tyto testy, dříve známé jako mikrobiální limitní testy (MLT), určují biologickou zátěž vzorku produktu. Toho je dosaženo spočítáním počtu jednotek tvořících kolonie, které vyrostly na kultivačním médiu pro známou velikost vzorku (CFU/g). Kritéria přijatelnosti jsou založena na celkovém počtu aerobních mikrobů (TAMC), celkovém počtu kvasinek a plísní (TYMC). Kromě toho se provádějí specifické testy k potvrzení přítomnosti nebo nepřítomnosti určitých mikroorganismů, které se mohou ukázat jako nežádoucí.
Složení kultivačních médií se liší podle prováděného testu a požadovaného mikroorganismu. Nejčastěji jsou kultivační média založena na živném bujónu (tekutině), často smíchaném s agarem a připraveném v Petriho miskách (mohou být polotuhé nebo pevné). U obohacených nebo selektivních médií se přidávají další specifické komponenty.
Příprava kultivačních médií musí být prováděna přesně, aby byl zajištěn správný mikrobiologický růst. Jednotlivé složky kultivačních médií (prášky, gely a tekutiny) musí být pečlivě zváženy podle receptury kultivačního média. Pro hlavní složky se obvykle používá přesná váha s odečitatelností od 1 mg do 10 mg. Pro vážení stopových prvků, jako je měď a zinek, může být vyžadována analytická váha. Pokud je vyžadováno menší množství kultivačních médií, je třeba dbát na správný přepočet množství přísad a pro splnění požadavků na přesnost může být vyžadována váha s vyšší odečitatelností.
Přesná příprava kultivačních médií je nezbytná pro zajištění správné podpory mikrobiologického růstu. Podívejte se na video a zjistěte, jak přesné váhy XPR od společnosti METTLER TOLEDO nejen pomáhají zajistit přesné složení růstových médií, ale také zjednodušují proces, což vám ušetří čas a námahu.
Příprava formulací kultivačních médií, včetně kapalných růstových médií a kultivačních médií na bázi živného agaru, je běžným postupem v každé mikrobiologické laboratoři. Proces formulace kultivačního média zahrnuje mnoho kroků a musí být prováděn opatrně, aby se zabránilo křížové kontaminaci a v konečném důsledku bylo chráněno zdraví spotřebitelů.
V závislosti na typu produktu a jeho účelu existují tři hlavní kategorie testů kontroly mikrobiální kvality, které vyžadují použití růstových médií:
| Typ výrobku | Test | Účel |
|---|---|---|
| Nesterilní | Testy mikrobiálního počtu | Spočítá celkový počet bakterií a/nebo plísní ve vzorku produktu |
| Nesterilní | Testy na specifické organismy | Identifikuje nežádoucí organismy, jako je salmonela, ve vzorku produktu |
| Sterilní | Testy sterility | Kontroluje sterilitu vzorku produktu |
Testovací postupy mikrobiálních limitů se provádějí za účelem zjištění, zda nesterilní produkt vyhovuje daným specifikacím mikrobiální kvality. Mezi takové nesterilní produkty patří kosmetické, zdravotnické a farmaceutické výrobky, které lze požívat, lokálně aplikovat nebo vdechovat. Účinnost takových produktů může být ovlivněna nebo dokonce eliminována přítomností určitých mikroorganismů a navíc mohou některé mikroorganismy nepříznivě ovlivnit zdraví spotřebitele. Testy mikrobiálního počtu jsou řadou testů, které mohou výrobci použít, aby zajistili, že biologická zátěž jejich hotových výrobků zůstane v bezpečných mezích.
Zatímco mnoho zemí má své vlastní pokyny pro stanovení bezpečnosti nesterilních produktů, na evropském, americkém a japonském trhu dochází k harmonizaci důležitých norem, jak je uvedeno v tabulce níže.
| Evropský lékopis (EP) | Americký lékopis (USP) | Japonský lékopis (JP) |
|---|---|---|
| 2.6.12: Mikrobiální vyšetření nesterilních produktů: Testy mikrobiálního počtu | <61>: Mikrobiální vyšetření nesterilních produktů: Testy mikrobiálního počtu | 4.05 I: Mikrobiální vyšetření nesterilních produktů: Testy mikrobiálního počtu |
| 2.6.13: Mikrobiální vyšetření nesterilních produktů: Testy na specifikované mikroorganismy | <62>: Mikrobiální vyšetření nesterilních produktů: Testy na specifické mikroorganismy | 4.05 II: Mikrobiální vyšetření nesterilních produktů: Testy na specifické mikroorganismy |
| 5.1.4: Mikrobiologická jakost nesterilních farmaceutických přípravků a látek pro farmaceutické použití | <1111>: Mikrobiologické vyšetření nesterilních výrobků: kritéria přijatelnosti farmaceutických přípravků a látek pro farmaceutické použití | 12: Mikrobiologické vyšetření nesterilních produktů: Kritéria přijatelnosti farmaceutických přípravků a látek pro farmaceutické použití |
Testování sterility potvrzuje, že produkty neobsahují životaschopné mikroorganismy a má zásadní význam pro zdravotnické prostředky, léčiva, tkáňové materiály a jakékoli další materiály, které tvrdí, že jsou sterilní nebo neobsahují životaschopné mikroorganismy. Kromě identifikace potenciální kontaminace se testování sterility používá také ke stanovení antimikrobiální účinnosti a k ověření sterilizačních postupů.
| Evropský lékopis (EP) | Americký lékopis (USP) | Japonský lékopis (JP) |
|---|---|---|
| 2.6.1: Sterilita | <71>: Testy sterility | 4.06: Test sterility |
Pufrovací roztoky jsou životně důležité v široké škále aplikací. Příprava pufru je však časově náročná a náročná na práci a musí být prováděna opatrně, aby se předešlo chybám. Pokud potřebujete podporu s přípravou pufru nebo chcete poradit, která váha splňuje vaše požadavky na přesnost, náš tým odborníků je tu pro vás. Neváhejte se na nás obrátit s žádostí o pomoc či radu.
Kultivační média a růstová média se často skládají z více než pěti složek, někdy až z 30. Takové složité procesy formulace vyžadují velkou péči a pozornost a i ten nejrychlejší laboratorní technik může potřebovat 1,5 hodiny na přípravu takové směsi.
Výpočty kultivačních médií
Typický recept na kultivační média produkuje 1 litr roztoku kultivačního média. Pokud je požadován jiný objem než 1 litr, je nutné odpovídajícím způsobem přepočítat všechna množství přísad a zaznamenat všechny nové hodnoty. Jakákoli chyba ve výpočtech nebo v protokolování nových hodnot může mít za následek, že kultivační médium nefunguje podle požadavků, což může vést k vážným následkům.
Vážení a záznam výsledků hmotnosti
Při dodržení receptury kultivačního média nebo přepočtených hodnot si musí být laboratorní technik jistý, že je použito správné množství každé přísady a že všechny přísady byly skutečně přidány. To může často znamenat odškrtávání ingrediencí ze seznamu při jejich vážení. Je třeba dbát na to, aby nedošlo k chybám při přepisu při zaznamenávání skutečných vah nebo při jejich přenosu do počítače. Použití dvou vah v procesu přípravy kultivačních médií zvyšuje složitost, snižuje efektivitu a zvyšuje riziko chyb.
Vlivy vážení
Složky kultivačních médií lze vážit do různých nádob od vážicích člunů až po pětilitrové kádinky. Všechny nádoby, stejně jako samotná váha, mohou být vystaveny vnějším vlivům, např. pohybu vzduchu, elektrostatickému náboji nebo magnetickému poli z míchadla, což může způsobit potíže, jako je tárování váhy, driftování a nestabilní odečty a delší doba usazování. Takové výzvy prodlužují dobu tvorby kultury médií, což ovlivňuje produktivitu.
Potíže s vážením v bezpečnostní skříni nebo digestoři
Účinky pohybu vzduchu v bezpečnostní skříni nebo digestoři lze zmírnit použitím ochranného krytu proti proudění vzduchu, který chrání váhu a nádobu. I když je ochranný kryt proti proudění vzduchu vynikajícím způsobem, jak zabránit chybám při vážení, má několik praktických nevýhod:
Dokumentace
Kultivační média musí být nejen plně označena, aby se zabránilo záměnám, ale všechna data související s kultivačními médii musí být zaznamenána a bezpečně uložena pro budoucí použití a sledovatelnost. Ruční zpracování velkého množství dat je časově náročné a nese s sebou vysoké riziko chyb.
Přesné váhy XPR společnosti METTLER TOLEDO nabízejí vysokou úroveň přesnosti a řeší mnoho problémů spojených s přípravou kultivačních médií, zjednodušují procesy a snižují pracovní zátěž laboratorních techniků. S odečitatelností od 0,1 mg do 100 mg a váživostí až 10 kg jsou přesné váhy XPR ideální pro širokou škálu aplikací přípravy kultivačních médií.
Recepty přímo na váze
Na váhu lze uložit až 50 receptů pro přípravu kultivačních médií jako metody vážení, což technikům umožní rychlý přístup k potřebnému receptu a zahájení práce. Na displeji váhy jsou k dispozici podrobné pokyny, takže technici mohou snadno sledovat, kde se v procesu přípravy kultivačních médií nacházejí.
Automatické výpočty a ukládání výsledků
Na začátku receptury kultivačního média technik jednoduše zadá požadovaný objem a množství ingrediencí se automaticky přepočítá. Váha vyzve technika k zvážení každé přísady, uloží skutečný výsledek hmotnosti a automaticky se přenastaví před přidáním další přísady. Výsledky není nutné zaznamenávat ručně a výsledky lze na konci automaticky vytisknout.
Není potřeba žádný ochranný kryt proti proudění vzduchu
Všechny přesné váhy XPR jsou vybaveny vážicí miskou SmartPan™. Pánev SmartPan poskytuje mimořádnou stabilitu tím, že minimalizuje vliv proudění vzduchu na snímač hmotnosti, což umožňuje vážení s odečitatelností 1 mg bez ochranného krytu proti proudění vzduchu. Pánev SmartPan umožňuje dosáhnout výsledků až dvakrát rychleji než standardní vážicí miska.
Snadné čištění
Čisté vybavení je nezbytné pro snížení rizika křížové kontaminace. Vážicí miska SmartPan zadržuje veškeré rozlité látky na dně misky, což umožňuje bezpečnou likvidaci. Pánev a dno lze snadno vyjmout a vyčistit v myčce nádobí. Ochranný kryt na těle váhy nejen chrání váhu tím, že pomáhá zabránit vniknutí rozlitých tekutin do snímače hmotnosti, ale hladký povrch se snadno čistí a zabraňuje usazování nečistot. Pro displej váhy jsou k dispozici chemicky odolné kryty, které lze po použití jednoduše zvednout a zlikvidovat, aby se zabránilo křížové kontaminaci.
Přesné váhy XPR společnosti METTLER TOLEDO lze propojit s naším patentovaným laboratorním softwarem LabX a vytvořit tak komplexní řešení pracovních postupů, které nabízí komplexní možnosti správy dat. Centralizovaná databáze poskytuje všem připojeným uživatelům přístup ke stejným SOP pro přípravu kultivačních médií, což zajišťuje, že každý technik dodržuje stejné postupy. Software se automaticky postará o všechny procesní informace a výpočty. Výsledky jsou bezpečně uloženy v databázi a lze k nim kdykoli přistupovat pro další analýzu a generování zpráv. Software prakticky eliminuje potřebu ručního zaznamenávání dat – automaticky lze tisknout i detailní etikety.
Řešení lze integrovat se stávajícími systémy ERP/LIMS, což umožňuje obousměrný přenos receptur a výsledků. Nástroje, úkoly a uživatele lze spravovat centrálně; Manažeři laboratoře mohou sledovat průběh úkolů v reálném čase, aniž by museli být přítomni v laboratoři. Ve vysoce regulovaných prostředích software pomáhá s dodržováním požadavků FDA na integritu dat ALCOA+.
Ať už potřebujete pouze rychlé a spolehlivé měření pH, nebo musíte splnit přísné předpisy, společnost METTLER TOLEDO vám může pomoci.
Špičková řada SevenExcellence nabízí intuitivní ovládání pomocí dotykové obrazovky OneClick™, což umožňuje spuštění uložených metod přímo ze zástupce na domovské obrazovce. Inteligentní správa senzorů zajišťuje, že vaše pH elektrody jsou vždy ve špičkovém stavu pro přesné výsledky. Řadu Seven Excellence lze připojit k softwaru LabX a zajistit tak sledovatelnost a integritu dat.
Pro měření pH na rovných površích, jako jsou agarové destičky, se doporučují specializované povrchové elektrody , jako je InLab Surface Pro-ISM .
Přáli jste si někdy, aby procesy vážení a dokumentace pro formulaci médií byly jednodušší? Je vám povědomá výzva reprodukce optimalizovaného složení média? Přečtěte si našeho průvodce a zjistěte, jak mohou přístroje, software a příslušenství na míru podpořit výzkumné a vývojové laboratoře při dosahování vysokého stupně spolehlivosti vážení, konzistence médií, celkové nákladové efektivity a kvality produktů v jejich recepturovacích procesech.
Aby se předešlo riziku chyb, nejlepší způsob přepočítání chyb je elektronicky. Pokud jsou množství receptu k dispozici v tabulce, lze nové hodnoty rychle vypočítat. Při použití přesné váhy XPR můžete nastavit metodu formulace kultivačních médií tak, aby vás vyzvala k zadání požadovaného objemu a cílové množství se vypočítá automaticky. Zůstatek vás vyzve k zadání požadovaných částek.
Tolerance vážení by měly být definovány ve vašem SOP pro přípravu kultivačních médií. Mohou být přesně specifikovány nebo uvedeny v procentech. Pokud potřebujete změnit objem receptury, je zde další výzva v podobě přepočítání horní a dolní hranice hmotnosti související s tolerancemi. U přesných vah XPR jsou tolerance zahrnuty v procentech při vytváření receptury kultivačního média. Horní a dolní mez hmotnosti se vypočítávají automaticky pro jakýkoli cílový objem. Vestavěný průvodce vážením vám pomůže dávkovat na cílovou hodnotu a zobrazí se zeleně, pokud jste v tolerančním rozsahu.
Nejjednodušším způsobem je uspořádat složky kultivačních médií podle seznamu a při přidávání je jeden po druhém odškrtávat. Tento proces však musí být prováděn pečlivě, aby nedošlo k chybám. Uložením SOP kultivačních médií jako metody na váze XPR vás váha vyzve k zadání každé přísady podle názvu a v požadovaném množství. Jakmile odtěžíte přísadu, výsledek hmotnosti a název přísady se automaticky uloží do vestavěného protokolu výsledků, který si můžete kdykoli prohlédnout. Váha se automaticky vytáruje a vyzve vás k přidání další přísady.
Na našich vahách XPR se hmotnosti složek kultivačních médií automaticky ukládají do vestavěného protokolu výsledků a lze je kdykoli zobrazit. Konečné výsledky lze vytisknout nebo přenést do počítače.
Nejlepší vyvážení závisí na vaší aplikaci a vašich požadavcích na přesnost. Při výběru zůstatku je třeba vzít v úvahu:
Z metrologického hlediska jsou tyto úvahy nezbytné pro definování požadavku na minimální navážku, váživosti váhy a bezpečného rozsahu vážení. Bezplatná služba doporučení GWP® od společnosti METTLER TOLEDO vám pomůže vybrat správnou váhu pro vaše potřeby a určí, zda je vaše stávající váha vhodná pro daný účel.
Váhy XPR jsou vybaveny funkcemi pro zajištění kvality, takže si můžete být jisti, že váha je vodorovná a rutinní testy jsou aktuální, než začnete vážit. Stav váhy je indikován indikátorem StatusLight™ zabudovaným na přední straně terminálu váhy. Na první pohled je vidět, že zelená barva znamená, že vážení je bezpečné, žlutá je varování a chyby jsou zobrazeny červeně.
Vestavěná knihovna rutinních testů obsahuje přizpůsobitelné šablony pro testy excentricity, opakovatelnosti a citlivosti. Pro zajištění sledovatelnosti je veden záznam o všech rutinních testech.
Laboratorní software LabX poskytuje maximální podporu pro zajištění shody. Implementací standardních operačních postupů v softwaru LabX si můžete být jisti, že všichni uživatelé budou dodržovat stejné postupy pro přípravu kultivačních médií. Software může také spravovat všechny funkce zajištění kvality, včetně plánování rutinních testů a blokování použití váhy v případě potřeby. Všechny výsledky a informace o procesu jsou bezpečně uloženy v centrální databázi, aby byla zajištěna sledovatelnost a napomáhalo shodě s FDA CFR část 11.
Pokud se váha neustálí, existuje vysoká pravděpodobnost, že je snímač hmotnosti ovlivňován elektrostatickým nábojem nebo průvanem vzduchu.
Při běžné manipulaci se může na nádobách a vzorcích hromadit elektrostatický náboj, takže neděláte nic špatně. Někdy je zůstatek schopen se vyrovnat, ale hodnota hmotnosti zobrazená na váze nemusí být skutečným množstvím přidané látky, což by mohlo vysvětlovat, proč je reprodukovatelnost špatná. Chcete-li odstranit elektrostatický náboj z nádob a vzorků, lze vedle váhy umístit volně stojící ionizátory.
Problémy s řešením mohou také nastat při používání bezpečnostní skříně nebo digestoře.
V takových prostředích může turbulentní proudění vzduchu nebo proudění vzduchu s laminárním prouděním působit na snímač váhy, což brání usazování váhy a ovlivňuje opakovatelnost.
Vážicí miska SmartPan na přesných vahách XPR minimalizuje vliv proudění vzduchu na snímač hmotnosti. Pánev SmartPan poskytuje vyšší stabilitu než standardní vážicí miska, umožňuje dodávat výsledky až dvakrát rychleji a zlepšuje opakovatelnost.
Váhy XPR obsahují funkce pro konfiguraci vzorových štítků se všemi požadovanými informacemi, včetně automatického výpočtu data expirace. Lze přidat i čárové kódy. Štítek lze vytisknout automaticky na konci procesu přípravy kultivačního média. Štítky METTLER TOLEDO odolávají teplotám sterilizace v autoklávu.
Dobrým nápadem je zahrnout na ingredience štítky s čárovým kódem, které jedinečně identifikují každý vzorek. Váhy XPR podporují čtečky čárových kódů. Čárový kód přísady se před přidáním do směsi kultivačních médií naskenuje, takže je snadné zkontrolovat, zda máte správnou přísadu. Po připojení váhy XPR k systému LabX se zobrazí varování, pokud znovu naskenujete stejný čárový kód, takže nebude možné přidat stejnou přísadu dvakrát.
Laboratorní software LabX se snadno integruje do systému LIMS a umožňuje obousměrný přenos informací mezi systémem LIMS a přístroji připojenými k systému LabX, včetně všech vah používaných pro přípravu kultivačních médií.
